Hongmei ZhangZhengjian YanMelissa LiMichael PeabodyTong-Chuan He基因与疾病(英文)Zhang H, Yan Z, Li M, Peabody M, He TC. CRISPR clear? dimeric Cas9-FoK1 nucleases improve genome-editing specificity. Genes Dis. 2014; 1:6-7.
只有当两个Fok1蛋白单体相互结合才能激活其核酸酶活力。本系统需要一对gRNA分别识别并结合在靶序列的正义链和反义链上面,引导deadSaCas9-Fok1中的deadSaCas9绑定于靶序列的正义链和反义链,从而使正反义链上deadSaCas9-Fok1中的Fok1蛋白单体能够相互靠近并结合,进而使Fok1的核酸酶活性被激活,并且针对靶序列进行双...
1. 一种dead SaCas9_ Fokl系统,其特征在于,包括dead SaCas9_ Fokl和第一SgRNA和 第二 sgRNA; 所述dead SaCas9_ Fokl是在dead SaCas9的C端融合Fokl内切酶而得到,所述dead SaCas9是将SaCas9中的两个活性位点RuvC和HNH失活后而得到的; 所述第一sgRNA识别并结合的靶序列位于目的基因的一条链上,所述第二...
pdead SaCas9Fok1重组质粒利用dead SaCas9替代传统的dead SpCas9,降低SpCas9空间位阻对Fok1相互结合的影响,从而提高其打靶效率;dead SaCas9Fok1系统需要配合2个21nt的SasgRNA共同作用,SasgRNA长于SpsgRNA(20nt),且SaCas9识别的PAM序列为6nt,长于SpCas9的PAM(3nt),所以当dead SaCas9Fok1配合两个SasgRNA使用,...
genome editing\\{TALENs\\}\\{ZFNs\\}sgRNAHongmei ZhangZhengjian YanMelissa LiMichael PeabodyTong-Chuan HeGenes & DiseasesZhang H, Yan Z, Li M, Peabody M, He TC. CRISPR clear? dimeric Cas9-FoK1 nucleases improve genome-editing specificity. Genes Dis. 2014; 1:6-7....