By using the properties and versatility of the Cell Penetrating Peptide (CPP) PepFect14, we developed a protocol to deliver a plasmid encoding for CRISPR-Cas9 and Green Fluorescent Protein (GFP) in BHM cell line expressing luciferase (Bomirsky Hamster Melanoma pLuc). Aiming to knocking down ...
再引导Cas9作用实现的,但是CRISPR/Cas9与靶位点识别的特异性主要依赖于gRNA与靠近PAM处10-12bp碱基的配对,而其余远离PAM处8-10bp碱基的错配对靶位点的识别影响不明显,这项研究直接说明了CRISPR/Cas9存在严重的脱靶性,即该技术可以发生非特异性切割,引起基因组非靶向位点的突变,这样会造成研究结果...
Charpentier本人并不在乎名声等身外之物,她说自己不介意做个局外人,“我从来没有真正加入学界小圈子”。她一直关注的是下一步工作,研究CRISPR-Cas9系统如何切割DNA。 在2011年的美国微生物学会(American Society for Microbiology)会议上,Charpentier遇到了加利福尼亚大学(University of California)伯克利分校的结构...