CRISPR是生物科学领域的游戏规则改变者,这种突破性的技术通过一种名叫Cas9的特殊编程的酶发现、切除并取代DNA的特定部分。这种技术的影响极其深远,从改变老鼠皮毛的颜色到设计不传播疟疾的蚊子和抗虫害作物,再到修正镰状细胞性贫血等各类遗传疾病等等。该技术具有非常精准、廉价、易于使用,并且非常强大的特点。CRISPR...
CRISPR/Cas系统来源于细菌的免疫系统,在原核生物中,CRISPR-Cas系统作为免疫系统,利用CRISPR RNAs(crRNAs)作为引导分子,靶向识别入侵核酸,在抵御外来病毒入侵。其发挥免疫的功能包括适应、表达和干扰3个阶段[1]。在适应阶段,细菌通过Cas蛋白(Cas1和Cas2)捕捉入侵的外来核酸,并整合至自身基因组的CRISPR 序列中形成记忆...
依据检测核酸分子类型,CRISPR/Cas技术核酸检测可分为DNA(CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas12和CRISPR/Cas12识别DNA序列)和RNA(CRISPR/Cas13识别RNA序列)检测(图1)。不同的CRISPR/Cas系统识别的核酸类型不同,然而检测过程中为了实现同一个CRISPR/Cas系统对DNA和RNA均能够检测,必须借助于转录技术(transcription,T)和逆...
一、CRISPR/Cas系统简介 CRISPR/Cas系统是细菌和古细菌保护自身免受外来遗传物质影响的适应性免疫系统,该系统发挥功能包括三个阶段:第一阶段是适应,细菌通过特定Cas蛋白从入侵的核酸中识别PAM位点(原间隔序列相邻序列)并将原间隔序列整合到细菌自身的CRISPR序列中;第二阶段是表达和成熟,CRISPR转录为pre-crRNA(RNA前体物...
CRISPR-Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。而CRISPR-Cas9基因编辑技术,则是对靶向基因进行特定DNA修饰的技术,这项技术也是用于基因编辑中前沿的方法。以CRISPR-Cas9基础的基因编辑技术在一系列基因治疗的应用领域都展现出极大的应用前景,例如血液病、肿瘤和...
CRISPR的每一次登场,总是自带话题性,从基因编辑,到专利之争,再到下一代分子诊断技术,特别是在分子诊断行业,总流传着它的传说。 一、CRISPR/Cas系统简介 CRISPR的全称是Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(成簇规律间隔的短回文重复序列),...
基于CRISPR/Cas系统的诊断技术自问世以来,其对无仪器核酸检测技术的需求推动了多种等温扩增技术和快速检测工具的发展。尤其以Cas12和Cas13为代表的单Cas酶反应体系更是获得快速发展,除在基因编辑领域已有诸多应用外,在诊断领域的发展同样迅速。本篇文章主要针对基于CRISPR/Cas技术的不同系统在诊断领域的应用进行简单介绍...
高效性:CRISPR/Cas技术能够在细胞内高效地切割目标DNA,实现基因的快速编辑。 精确性:通过设计特定的引导序列,CRISPR/Cas系统能够准确地定位到基因组的特定位置,进行精准的编辑。 广泛应用:该技术不仅适用于模式生物,如小鼠、大鼠等,还成功应用于人类细胞、植物和微生物的基因编辑。
细菌和古菌(archaea)会产生CRISPR-Cas系统,主要是为了应对外部的病毒入侵(特别是噬菌体)以及其他的遗传元素,比如质粒。这是一个细菌的免疫系统,用来识别和抵御外来DNA。 CRISPR系统的全名是“簇状规律间隔短回文重复序列(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)”,它通过在基因组中存储过去遭遇的病毒或...