今天结束的就是CAR T细胞治疗研究中的重要实验方法,即CAR T细胞活化水平以及增殖能力的检测。 CAR T 细胞活化水平的检测 细胞激活指标 CD69、细胞脱颗粒指标 CD107a、细胞杀伤因子指标如干扰素-γ、颗粒酶 B 均可以指示 CAR T 细胞的活化水平,并且这些指标可通过细胞表面染色或细胞内染色后使用流式细胞术进行检测。
CAR T 细胞增殖能力的检测 (1)计数检测 T 细胞数目变化 对NKG2D-CAR T、IL-4R/IL-15R-NKG2D-CAR T 细胞进行计数,将细胞密度调整为 3.3×105个/mL,每种细胞取六份,每份为 100 μL 即 3.3×104个,加入 48 孔板中,三份中分别加入 2×105个 Panc-1 细胞,所有孔补齐至 300 μL,37℃,5% CO2培养。...