NK细胞纯度>98%,NK细胞被有效激活,CAR-NK比例为59%。 以下为该CAR-NK细胞培养实验的具体描述。 图1:CAR-NK制备流程图 预扩增 PBMC细胞经磁珠分选,获得高纯度的NK细胞。激活后的NK细胞在细胞培养板或培养瓶中静置培养,放于37℃,5%CO2培养箱进行预扩增7天左右(期间采用携带CAR基因的病毒对NK细胞进行基因转导)。
制备方法包括:构建重组慢病毒载体质粒或逆转录病毒载体质粒;重组慢病毒或重组逆转录病毒制备;重组慢病毒或重组逆转录病毒感染K562细胞;筛选得到表达靶蛋白的滋养层细胞;用于CAR‑NK细胞扩增培养。本申请所获得的用于CAR‑NK细胞培养的滋养层细胞能够极大提高CAR‑NK细胞培养过程中CAR表达的阳性率和扩增效率,增强CAR...
1.一种car-nk细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:s1、采集健康供者的外周血,分离得到外周血单个核细胞;s2、从外周血单个核细胞中分选出nk细胞;s3、将带有嵌合抗原受体基因的慢病毒载体感染步骤s2的nk细胞;s4、将步骤s3的nk细胞移入无血清的dmem培养基培养24～48h后,将细胞密度调整为(1～3)×10个/ml并...
岗位职责: 1、 负责在无菌操作下,协助高级细胞培养工程师或细胞培养工程师使用细胞工厂或生物反应器等进行大规模工业化细胞培养,包括细胞复苏、冻存、传代等实验,操作符合GMP药品生产管理规范; 2、 负责在无菌操作下,协助高级细胞培养工程师或细胞培养工程师进行质粒转染、病毒转导等实验,操作符合GMP药品生产管理规范; ...
北京泽平代理的美国Wilson Wolf G-Rex底透气型细胞培养瓶,针对悬浮细胞培养设计,实现细胞快速扩增和封闭条件下收获,特别适用于免疫细胞的实验室研究和大规模GMP生产,目前已成功用于包括CAR-T、CAR-NK、TCR-T在内的多种工程细胞的封闭式培养中: ①免疫细胞培养 ...
NK-92细胞系于1992年从1例50岁的非霍奇金氏淋巴瘤男性患者体内分离得到,生长呈IL-2依赖性。基于CAR-NK 制备的需求,NK-92细胞的需要全程无血清且需要经过单次或多次基因改造,使其成为具备特异性肿瘤杀伤活性的CAR-NK 细胞; 本期,...
该ROBO1CAR‑NK92细胞复苏培养基包括基础培养基和添加剂;所述添加剂由细胞生长因子和B族维生素组成。在基础培养基HIPPTM‑T009中添加IL‑2和烟酰胺能够明显提升ROBO1CAR‑NK92细胞的复苏活率和缩短细胞活率恢复至80%的传代时间,易于规模化培养。 (19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN ...
Wilson Wolf成立于1998年,致力于开发哺乳动物细胞培养设备,我们已经创建了用于多种应用的细胞培养设备,包括单克隆抗体生产,活体皮肤,角膜存储,用于1型糖尿病的胰岛移植,免疫疗法和常规细胞培养。 我们目前的重点 为免疫疗法领域提供*佳的细胞生产技术。 我们的G-Rex®产品线已迅速被该领域用作黄金标准。为执行常规细...
本发明涉及细胞生物学的,具体涉及一种robo1 car-nk92细胞复苏培养基,试剂盒及复苏培养方法。 背景技术: 1、自然杀伤细胞(natural killer cell,nk)是机体重要的免疫细胞类型,主要分布在外周血中。nk细胞作为机体防御体系的第一道防线,不仅可以在天然免疫系统发挥其杀伤衰老细胞,病变细胞以及恶性转化的肿瘤细胞的能力,...
康宁人淋巴细胞无血清培养基(适用于DC/CIK、NK、CAR-T等) 康宁(Corning)KBM 581是配方优化升级后的一款性价比*的淋巴细胞无血清培养基,近两年已经受到广大客户的认可并更换了早期的老版本KBM 551。 康宁KBM 551培养基是zui早zui的一款淋巴细胞无血清培养基,现在大部分客户已经升级换代到KBM 581新版本,老版本的KBM...