转染两天后,裂解后用于qpcr分析。同时分离视网膜以测定aav的表达。使用trizol(ambion)提取rna,并使用逆转录试剂盒(用于qpcr的hiscript q rt supermix,vazyme,biotech)将其转变为cdna。使用aceq qpcrsybr green master mix(vazyme,biotech)追踪扩增过程。 [0192] c-myc qpcr引物是:上游引物:5 ’‑ cctggtgctccatgag...
通信作者:孙刚,Email:sung853219@126.com 【摘要】目的探索长链非编码RNA 00461(LINC00461)对三阴性乳腺癌细胞凋亡的影响。方法用RT-qPCR检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A与TNBC细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞中LINC00461的表达。Annexin...
产品提供了qPCR过程中所需的全套试剂,包括反应混合液,引物混合物,标准品,只需添加提取好的DNA即可开始实验,操作简单方便、省时省力。反应混合物使用了高效、快速的热启动BaldStar Taq DNA Polymerase,扩增灵敏度高,特异性好,缩短了程序反应的时间。 ??ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于...
为了鉴定c-myc 反义RNA 对c-myc 基因表达的影响及其在ALV-J 增殖中的作用,本研究通过cDNA 末端快速扩增(RACE )技术、PCR 扩增5'-race 和3'-race 后对其编码属性的分析鉴定结果显示,鸡c-myc 原癌基因反义RNA 全长621bp ,且不编码蛋白;该反义RNA 序列定位于鸡2号染色体,且源自c-myc 外显子3反向...
为比较 c-myc 软骨分化过程的基因表达, 提取培养至第 7 天的 P2 代软骨细胞和 HeLa 细胞的 基因 c-myc GAPDH 表 1 qPCR 检测用引物 引物序列(5'-3') F :CAAATGTGCCAGCCCAAGGTTTTC R :CTCTGGGATCTGGTCACGAAGAGCA F :GGTGCTGAGTATGTGGTGGA R :GGCATTGCTGACAATCTTGA 退火温度 /℃ 63 63 扩增片段 ...
[0252]由于Oct4在多能性诱导和维持中的关键作用, 本发明人用ChIP‑qPCR单独研究了这种情况。设计引物以覆盖沿17号染色体Oct4调节区从Oct4的第一外显子到远端增强子的大区域(图6K)。与ChIP‑seq数据类似, 早在第2天就能看到Sox2和Klf4在远端增强子处的结合, 而在近端增强子和启动子区域发现Sox2和Klf4的结合要...
4%多聚甲醛固定液购自上海碧云天生物技术有限公司;二甲基亚砜(DMSO)、MTT试剂盒、姬姆萨染色原液(×10)、AnnexinV FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、BCA蛋白质检测试剂盒均购自北京索莱宝科技有限公司;L15培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购自上海赛百慷生物技术股份有限公司;引物...
[摘要]【目的】探究不同用量纳米氧化铜(nano-CuO )对藏鸡生产性能及肝组织原癌基因(c-Myc )表达的影 响。【方法】取14日龄藏鸡120羽,随机分为空白对照组和低、中、高不同剂量nano-CuO 组,每组设置3个重复,空白 对照组藏鸡饲喂基础日粮,nano-CuO 低、中、高剂量组藏鸡分别饲喂添加5,50和100 mg/kg...
使用 ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix(Vazyme),用 Bio-Rad CFX96 检测系统进行 qPCR 反应.通过比较 2-ΔΔCt值来计算基因的倍数变化.以 GAPDH 为内参. 引物序列如下: MYH9 Forward: 5'-AGTTTGTCTCGGAGCTGTGG-3'; MYH9 Reverse: 5'-GGTTCGTGTTCCTCAGCGTA-3'; GAPDH Forward: 5'-CAATGACCCCTTCATTGACC...
另外,还做了CHIP-qPCR,也是发现了只有用setB区段的引物,才会出现同样的现象。另外,Ccnd2是受MYC调节的周期蛋白,这里是作为阳性对照。这些结果说明:MYC通过与Cers4上游500bp的EBOX结合来调控Cers4的转录表达。 在肠原代中,用shRNA敲低Cers4,ceramide...