此外,用蛋白酶体抑制剂MG132处理显着减弱了USP16敲低对c-Myc蛋白水平的影响。接下来,作者使用放线菌酮(CHX)追踪分析检查了USP16是否可以调节c-Myc的稳定性。作者发现USP16的异位表达增强了c-Myc蛋白的稳定性,而USP16敲低降低了c-Myc蛋白的半衰期。 图4.USP16在转录后水平调节c-Myc稳定性 研究结论:USP16通过...
此外,用蛋白酶体抑制剂MG132处理显着减弱了USP16敲低对c-Myc蛋白水平的影响。接下来,作者使用放线菌酮(CHX)追踪分析检查了USP16是否可以调节c-Myc的稳定性。作者发现USP16的异位表达增强了c-Myc蛋白的稳定性,而USP16敲低降低了c-Myc蛋白的半衰期。 图4.USP16在转录后水平调节c-Myc稳定性 研究结论:USP16通过...
然而qRT-PCR结果显示,PFKP对c-Myc的调控不在mRNA转录水平(图2D-E)。研究团队通过CHX(环己酰亚胺)追踪分析检测蛋白质稳定性,与对照组相比,PFKP敲低的细胞中c-Myc的降解显著加速(图2G-H)。此外,MG132预处理可以抑制PFKP耗竭引起的c-Myc的加速降解(图2F)。泛素化分析表明,PFKP的缺失促进了c-Myc的泛素化和降解,...
然而qRT-PCR结果显示,PFKP对c-Myc的调控不在mRNA转录水平(图2D-E)。研究团队通过CHX(环己酰亚胺)追踪分析检测蛋白质稳定性,与对照组相比,PFKP敲低的细胞中c-Myc的降解显著加速(图2G-H)。此外,MG132预处理可以抑制PFKP耗竭引起的c-Myc的加速降解(图2F)。泛素化分析表明,PFKP的缺失促进了c-Myc的泛素化和降解,...
作者使用翻译抑制剂CHX评估了c-Myc蛋白的稳定性,并证实METTL5延长了c-Myc蛋白的半衰期(图4A)。用蛋白酶体抑制剂MG132进行预处理可防止c-Myc稳定性的提高(图4B),表明METTL5敲除破坏了c-Myc的稳定性,导致其被蛋白酶体降解。随后的泛素化试验表明,METTL5过表达降低了c-Myc的泛素化和降解(图4C)。
HeLa细胞分为对照组和20 μmol/L胡桃醌组,在培养0、2、4、8 h分别用Western blot检测c-Myc蛋白表达的变化;放线菌酮(CHX)法检测c-Myc蛋白半衰期的变化;CoIP方法检测c-Myc蛋白降解影响。HeLa细胞分为空白对照组:正常培养;胡桃醌组:20 μmol/L胡桃醌培养液培养;0.5、1.0、2.0 μmol/L MG132组:分别与0、...
此外,用蛋白酶体抑制剂MG132处理显着减弱了USP16敲低对c-Myc蛋白水平的影响。接下来,作者使用放线菌酮(CHX)追踪分析检查了USP16是否可以调节c-Myc的稳定性。作者发现USP16的异位表达增强了c-Myc蛋白的稳定性,而USP16敲低降低了c-Myc蛋白的半衰期。
环己亚胺(CHX)处理细胞表明,敲低HDAC1加速c-Myc蛋白的降解,表明HDAC1诱导的c-Myc去乙酰化可以稳定其表达(图3k)。此外,蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞,表明HDAC1敲低诱导的c-Myc降解与泛素-蛋白酶体系统相关(图3l)。Co-IP分析显示MS275处理后,c-Myc的泛素化水平显著增加,证明抑制去乙酰化酶活性增强了c-Myc的泛素...
C–F 48 h after USP43 knockdown, UM-UC-3 (C) and 5637 (D) cells were treated with 50 μg/mL CHX and then harvested at the indicated time points. The statistical plot (E, F) represents the intensity of c-Myc bands detected by Western blot analysis (C, D, n = 3). ...
为了研究蛋白质稳定性,用环己酰亚胺 (CHX) 处理以抑制蛋白质合成。与对照组相比,CASC8 敲低细胞中 c-Myc 的降解率显著增加(图 6 J-K)。此外,敲低 CASC8 显著降低了下游 c-Myc 靶基因的 mRNA 水平(图 6 L)。总之,这些发现表明 CASC8 可能与 c-Myc 蛋白结合,促进其稳定性,从而激活下游效应分子。