细胞增殖检测、细胞周期、5-溴-脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）、脱氧核糖核酸酶DNase I、流式细胞术 材料与试剂 15ml离心管（BD Falcon, catalog number: 352097）12×75mm的5ml聚苯乙烯流式管（BD Falcon, catalog number: 352008）200目过滤尼龙网22μm滤器（Pall, catalog number: 4612）HeLa细胞系脱氧核糖核酸酶DNase...
下面是BRDU细胞染色实验的详细步骤。 实验材料和试剂准备: 1.细胞培养基:根据实验需要选择合适的培养基,例如DMEM、RPMI-1640等,并添加适当浓度的胎牛血清或其他所需的血清。 2. BRDU标记试剂:购买商业提供的BRDU标记试剂,如BRDU胸腺嘧啶标记试剂盒。 3.磷酸缓冲液(PBS):配制pH 7.4的PBS溶液。 4. 75%乙醇。
建议采用EdU细胞增殖检测方法,无需变性,无需酶解,无需抗体,小分子染色,3小时完成实验。EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo?荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通 快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需...
BrdU标记法能直接测定DNA复制能力,是准确检测细胞增殖能力的方法之一。BrdU可与胸腺嘧啶核苷竞争插入复制的DNA双链中,并在子代细胞中稳定存在。利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量,从而判断细胞的增殖能力。 1、实验步骤 细胞培养:将所需细胞接种在孔板中,培养至细胞密度至60%左右。 BrdU标记:向培养体系加入BrdU(终浓...
一、实验材料: 1. BrdU (5-溴代-脱氧尿苷) (Sigma Catalog No.B-5002) 2. RNase A (Sigma Catalog No. R4642) 3. Tween 20 (Fisher Biotech BP337-500) 4. Triton X-100 (Sigma Catalog No. T9284) 5. BSA (Sigma Catalog No. A 3803) ...
实验方法原理 细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞...
细胞增殖实验(Brdu法)细胞增殖实验(Brdu法)1.将盖玻片放入到24孔板中，将长满的大盘细胞用胰酶消化后，按1-2万个细胞/孔加入到24孔板中。2.待细胞长至50%-60%的密度后，更换培养液，导入相应质粒，4-6小时后更换培养液。3.培养24h后，于每孔板加入10µm的Brdu，继续培养4h。4. 4％冷的多聚甲醛固定20...
BRDU实验的基本原理是,将BRDU添加到细胞培养基中,当细胞开始进行DNA合成时,BRDU就会被用作尿嘧啶的替代物,从而被纳入细胞DNA中。在实验结束时,可以通过检测细胞中BRDU含量来确定细胞的增殖率。 BRDU实验通常用于检测细胞增殖活性,它的原理是:在细胞增殖的过程中,细胞DNA会发生合成,而BRDU是一种合成的DNA标记物,它...
一、实验材料: 1.BrdU(5-溴代-脱氧尿苷) (Sigma Catalog No.B-5002) 2. RNase A (Sigma Catalog No. R4642) 3. Tween 20 (Fisher Biotech BP337-500) 4. Triton X-100 (Sigma Catalog No. T9284) 5. BSA (Sigma Catalog No. A 3803) ...
通过检测BrdU的掺入，可以评估细胞的DNA合成和增殖情况。数据分析 剂量-反应关系：绘制化合物浓度与细胞增殖抑制或促进的关系曲线。半数抑制浓度（IC50）：计算导致细胞增殖率下降50%的化合物浓度，作为细胞增殖毒性的指标。结论 细胞增殖毒性实验为化合物的安全性和毒性评估提供了重要信息。通过这些实验，研究人员可以筛选...