BRDU实验的基本原理是,将BRDU添加到细胞培养基中,当细胞开始进行DNA合成时,BRDU就会被用作尿嘧啶的替代物,从而被纳入细胞DNA中。在实验结束时,可以通过检测细胞中BRDU含量来确定细胞的增殖率。 BRDU实验通常用于检测细胞增殖活性,它的原理是:在细胞增殖的过程中,细胞DNA会发生合成,而BRDU是一种合成的DNA标记物,它...
BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强溴脱氧尿嘧啶核苷是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物,通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强度可能与细胞增殖异常有关,如肝癌细胞约11.6%的胸腺嘧啶被替代,而正常肝细胞仅有1.1%。 既往在分子遗传学等研究中常采用同位素标记,但有放射污染,技术难度大,...
细胞增殖实验BrdU法原理: 操作步骤: (1)细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35 mm培养皿中(内放置一盖玻片),培养1 d,用含0.4%FBS培养液同步化3 d,使绝大多数细胞处于G0期。 (2)加入BrdU(储液:1.0 mg/ml,终浓度为0.03 μg/ml),37℃,孵育40min。 (3)弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。 (4)甲醇/醋酸固...
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为观察这一现象,可将植物细胞置于含有BrdU培养基中培养,让细胞增殖,因BrdU在DNA复制时可代替胸腺嘧淀脱氧核苷酸掺入到DNA子链中。经特殊染色后,如DNA的一条单链掺有BrdU则着色深,DNA的两条单链都掺有BrdU则着色浅。本实验所运用的原理不包括( ) A.DNA的半保留复制B.植物的组织培养...
1. 用100μM的BrdU工作液(用5mg/ml的储存液以6μL/mL稀释而成)标记细胞。 胚胎干细胞,30分钟 ;3T3细胞,2.5小时 ;二倍体成纤维细胞,4-6小时。 2. 胰酶消化细胞,用PBS洗脱,400×g或1700rpm离心5分钟,去上清,加入10 mL 70% EtOH重悬。 3. 保存在-20℃过夜或数天。
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