我们的Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统提供了一种快速、强力、可靠的方法来制备重组杆状病毒,从而在昆虫细胞中表达感兴趣的基因。经基因工程改造的pFastBac™载体与TOPO平末端克隆技术结合在一起可将你的克隆反应简化至仅需5分钟的实验台反应,相比而言传统的限制性酶切克隆...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统主要包括: *pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。 *一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性:•节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-to-Bac 系统,pFastBac 载体表达盒与 DH10Bac 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆状病毒...
将一个改造后的acnpv基因组转化入大肠杆菌使它像普通质粒一样能在细菌中复制由于太大只限单拷贝将其称之为杆状病毒穿梭载体baculovirusshuttlevector又称病毒质粒baculovirusplasmid将其首尾合写而成为bacmid通过位点特异性转座在大肠杆菌内完成病毒基因组的重组 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是一种快速、高效产生重组苜蓿...
Bac-to-Bac系统的转移载体 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性: •节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-...
重组杆状病毒的产生以及使Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因：AcBac的构建策略是将一拷贝的大肠杆菌Tn7转座子靶位点mini-att Tn7（置于LacZα片段内以方便进行重组子的蓝白斑选择）、复制子mini-F和卡那霉素抗性基因Kan插入AcMNPV基因组的polyhedrin基因位置，取代了杆状病毒非必需基因polyhedrin的编码序列而获得...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统主要包括:*pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。*一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。*一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染细胞后...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统主要包括: *pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。 *一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染...
大肠杆菌表达系统是实验室进行蛋白纯化的基本系统,培养费用低,能高效地表达外源蛋白,缺点是不能进行蛋白表达后修饰。杆状病毒-昆虫细胞表达系统能利用昆虫细胞体系进行正确的蛋白后修饰,培养成本也较哺乳动物细胞低,杆状病毒启动子高效启动蛋白表达,并且能容下较大的外源基因组。
使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因所需的一般步骤: 与使用同源重组的传统方法相比,使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统产生重组杆状病毒具有以下优点: 1、鉴定和纯化重组杆状病毒所需时间不到2周,而使用同源重组产生重组杆状病毒需要4-6周; 2、由于从选定菌落分离的重组病毒DNA不与亲本、非重组病毒混合,因此减...