我们的Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统提供了一种快速、强力、可靠的方法来制备重组杆状病毒,从而在昆虫细胞中表达感兴趣的基因。经基因工程改造的pFastBac™载体与TOPO平末端克隆技术结合在一起可将你的克隆反应简化至仅需5分钟的实验台反应,相比而言传统的限制性酶切克隆...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性:•节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-to-Bac 系统,pFastBac 载体表达盒与 DH10Bac 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆状病毒...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统主要包括: *pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。 *一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性: •节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-to-Bac 系统,pFastBac 载体...
使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因所需的一般步骤：与使用同源重组的传统方法相比，使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统产生重组杆状病毒具有以下优点：1、鉴定和纯化重组杆状病毒所需时间不到2周，而使用同源重组产生重组杆状病毒需要4-6周；2、由于从选定菌落分离的重组病毒DNA不与亲本、非重组病毒混合，因此...
1、Bac-to-Bac表达系统pFastBac-X重组质粒的构建利用分子生物学技术构建所需的pFastBac重组质粒,以DH5a为宿主,进行扩增.(以下以pFastBac-X为例进行说明pFastBac-x重组质粒的转座步骤:制备LB琼脂平板。LB培养液(含Agar):胰蛋白冻10g/l,Nacl10g/l,酵母提取物5g/l,Agar15g/l高压灭菌后,培养基温度下降至60C左右迅速...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统促进了重组杆状病毒的快速有效产生。基于Luckow等人1993年开发的方法,Bac-to-Bac杆状病毒表达系统利用Tn7转座子的位点特异性转座特性来简化和增强产生重组bacmid DNA的过程。Bac-to-Bac杆状病毒表达系统促进了重组杆状病毒的快速有效产生。基于Luckow等人1993年开发的方法,Bac-to-Bac杆状病毒表...
大肠杆菌表达系统是实验室进行蛋白纯化的基本系统,培养费用低,能高效地表达外源蛋白,缺点是不能进行蛋白表达后修饰。杆状病毒-昆虫细胞表达系统能利用昆虫细胞体系进行正确的蛋白后修饰,培养成本也较哺乳动物细胞低,杆状病毒启动子高效启动蛋白表达,并且能容下较大的外源基因组。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统促进了重组杆状病毒的快速有效产生。基于Luckow等人1993年开发的方法,Bac-to-Bac杆状病毒表达系统利用Tn7转座子的位点特异性转座特性来简化和增强产生重组bacmid DNA的过程。 该系统的第一个主要组成部分是一个pFastBac载体,目的基因将被克隆到该载体中。根据所选的pFastBac载体,目的基因的表...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统主要包括: *pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。 *一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染...