1)背景介绍 大肠杆菌表达系统是实验室进行蛋白纯化的基本系统,培养费用低,能高效地表达外源蛋白,缺点是不能进行蛋白表达后修饰。杆状病毒-昆虫细胞表达系统能利用昆虫细胞体系进行正确的蛋白后修饰,培养成本也较哺乳动物细胞低,杆状病毒启动子高效启动蛋白表达,并且能容下较大的外源基因组。 苜蓿银纹夜蛾多(核壳体)核型...
提取重组BacmidDNA转染昆虫细胞系，即可获得可表达目的基因的重组病毒。使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因所需的一般步骤：与使用同源重组的传统方法相比，使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统产生重组杆状病毒具有以下优点：1、鉴定和纯化重组杆状病毒所需时间不到2周，而使用同源重组产生重组杆状病毒需要4-6周；2...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统 Proven technology with quick, 5-minute TOPO cloning procedure 经验证的TOPO5分钟内快速克隆技术 我们的Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统提供了一种快速、强力、可靠的方法来制备重组杆状病毒,从而在昆虫细胞中表达感兴趣的基因。经基因...
在杆状病毒储备被扩增和滴度测定后,这种高滴度储备可用于感染昆虫细胞以大规模表达重组蛋白。 重组杆状病毒的产生以及使Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因: AcBac的构建策略是将一拷贝的大肠杆菌Tn7转座子靶位点mini-att Tn7(置于LacZα片段内以方便进行重组子的蓝白斑选择)、复制子mini-F和卡那霉素抗性基因...
应用bac—to—bac杆状病毒表达系统在sf9昆虫细胞中重组表达CDNF蛋白 杆状病毒表达系统sf9昆虫细胞重组表达bacF蛋白CDN应用诱导表达我们通过bac—to—bac杆状病毒表达系统,在st9昆虫细胞中诱导表达出重组CDNF蛋白,现报道如下。张俊牛朝诗梅加明汤深凤李静中华实验外科杂志...
一旦pFastBac表达质粒转化到DH10Bac细胞中,pFastBac载体上的mini-Tn7元件和bacmid上的mini-AttN 7靶位点之间就会发生转座,从而产生重组bacmid。这种转座反应发生在辅助质粒提供的转座蛋白存在的情况下。一旦你进行了转座反应,你将分离高分子量的重组杆状病毒DNA,并将杆状病毒DNA转染到昆虫细胞中,以产生可用于初步表达实验...
利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达外源蛋白 一、实验目的 1.了解Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的原理和特点。 2.掌握昆虫Sf9细胞的培养方法。 3.掌握杆状病毒侵染昆虫细胞并表达蛋白的方法。 二、实验原理 杆状病毒表达系统是一种颇受欢迎的超量表达重组蛋白质的真核细胞表达系统。与细菌 ...
Bac-to-Bac HBM TOPO 分泌表达系统可在蜂素(HBM)分泌信号作用下进行分泌蛋白的表达。该表达系统非常适用于毒性蛋白和糖蛋白(需要分泌信号以进行糖基化)的研究。另外,由杆状病毒分泌的糖蛋白可在体外轻松去糖基化,这一点在蛋白结晶中非常重要。其它优点还包括: ...
Bac-to-Bac系统的转移载体 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性: •节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-...
Bac-to-Bac 昆虫杆状病毒表达系统操作手册 下载积分: 2000 内容提示: Bac-to-Bac ® Baculovirus Expression System Version D 6 April 2004 10359 Bac-to-Bac ® Baculovirus Expression System An efficient site-specific transposition system to generate baculovirus for high-level expression of recombinant ...