Bac-to-Bac表达系统的优势: 滴度可高至10 8 pfu,可以进行大规模蛋白表达 pFastBac™ 载体含多角体启动子,可获得高得率的重组蛋白 可靠快速的TOPO 5分钟平末端克隆,节省时间 N端及C端添加的6xHis 标签可轻松进行纯化 含有TEV 蛋白酶位点可用于去除N端及C端的标...
*一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染细胞后产生重组杆状病毒,表达β-葡萄糖酸酐酶和/或氯霉素乙酰转移酶。 Bac-to-Bac表达系统的优点: 使用这个系统产生重组杆状病毒较传统的同源重组有以下优...
1、Bac-to-Bac表达系统pFastBac-X重组质粒的构建利用分子生物学技术构建所需的pFastBac重组质粒,以DH5a为宿主,进行扩增.(以下以pFastBac-X为例进行说明pFastBac-x重组质粒的转座步骤:制备LB琼脂平板。LB培养液(含Agar):胰蛋白冻10g/l,Nacl10g/l,酵母提取物5g/l,Agar15g/l高压灭菌后,培养基温度下降至60C左右迅速...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性:•节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-to-Bac 系统,pFastBac 载体表达盒与 DH10Bac 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆状病毒...
重组杆状病毒的产生以及使Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因：AcBac的构建策略是将一拷贝的大肠杆菌Tn7转座子靶位点mini-att Tn7（置于LacZα片段内以方便进行重组子的蓝白斑选择）、复制子mini-F和卡那霉素抗性基因Kan插入AcMNPV基因组的polyhedrin基因位置，取代了杆状病毒非必需基因polyhedrin的编码序列而获得...
Bac-to-Bac系统的转移载体 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性: •节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-...
Bac to Bac将一个改造后的acnpv基因组转化入大肠杆菌使它像普通质粒一样能在细菌中复制由于太大只限单拷贝将其称之为杆状病毒穿梭载体baculovirusshuttlevector又称病毒质粒baculovirusplasmid将其首尾合写而成为bacmid通过位点特异性转座在大肠杆菌内完成病毒基因组的重组 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是一种快速、高效...
使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因所需的一般步骤: 与使用同源重组的传统方法相比,使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统产生重组杆状病毒具有以下优点: 1、鉴定和纯化重组杆状病毒所需时间不到2周,而使用同源重组产生重组杆状病毒需要4-6周; 2、由于从选定菌落分离的重组病毒DNA不与亲本、非重组病毒混合,因此减...
Bactobac表达系统中文版说明书.doc,Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 试剂盒内容物: Introduction: Overview: Bac-to-Bac杆状病毒表达系统提供快速有效的方法产生重组杆状病毒。此方法基于让已经转入杆状病的质粒(杆粒)的位点特意转座子的表达框的质粒在Ecoli中扩增。Bac-to
Bac-to-Bac 表达系统精简Bac-to-Bac 表达系统 I. pFastBac-X 重组质粒的构建 利用分子生物学技术构建所需的 pFastBac 重组质粒,以 DH5α 为宿主,进行扩 增.(以下以 pFastBac-X 为例进行说明. II. pFastBac-x 重组质粒的转座步骤: 1. 制备 LB 琼脂平板。 LB 培养液(含 Agar):胰蛋白冻 10g/l,Nacl ...