Bac-to-Bac表达系统的优势: 滴度可高至10 8 pfu,可以进行大规模蛋白表达 pFastBac™ 载体含多角体启动子,可获得高得率的重组蛋白 可靠快速的TOPO 5分钟平末端克隆,节省时间 N端及C端添加的6xHis 标签可轻松进行纯化 含有TEV 蛋白酶位点可用于去除N端及C端的...
Bac-to-Bac HBM TOPO 分泌表达系统可在蜂素(HBM)分泌信号作用下进行分泌蛋白的表达。该表达系统非常适用于毒性蛋白和糖蛋白(需要分泌信号以进行糖基化)的研究。另外,由杆状病毒分泌的糖蛋白可在体外轻松去糖基化,这一点在蛋白结晶中非常重要。其它优点还包括: ...
Bac-to-Bac系统的转移载体 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。该系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成。该系统具有以下特性: •节省时间的表达杆状病毒质粒:—凭借 Bac-...
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统促进了重组杆状病毒的快速有效产生。基于Luckow等人1993年开发的方法，Bac-to-Bac杆状病毒表达系统利用Tn7转座子的位点特异性转座特性来简化和增强产生重组bacmid DNA的过程。该系统的第一个主要组成部分是一个pFastBac载体，目的基因将被克隆到该载体中。根据所选的pFastBac载体，目的基因的表...
如何安全便捷地表达蛋白--Bac-to-Bac表达系统mp.weixin.qq.com/s/KsbKSVVSBTQKX_BBPStx6Q Bac-to-Bac杆状病毒表达系统促进了重组杆状病毒的快速有效产生。基于Luckow等人1993年开发的方法,Bac-to-Bac杆状病毒表达系统利用Tn7转座子的位点特异性转座特性来简化和增强产生重组bacmid DNA的过程。Bac-to-Bac杆状...
*一个Ecoli宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染细胞后产生重组杆状病毒,表达β-葡萄糖酸酐酶和/或氯霉素乙酰转移酶。 Bac-to-Bac表达系统的优点: 使用这个系统产生重组杆状病毒较传统的同源重组有以下优...
Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统主要包括: *pFastBac 捐献质粒的选择,它要能够产生包含目的位点的表达结构,这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。 *一个 Ecoli 宿主,DH10Bac,包含杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染 pFastBac 表达结构后可以产生重组杆粒。 *一个控制表达的质粒,包括 Gus 和/或 CAT ...
使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的基因所需的一般步骤: 与使用同源重组的传统方法相比,使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统产生重组杆状病毒具有以下优点: 1、鉴定和纯化重组杆状病毒所需时间不到2周,而使用同源重组产生重组杆状病毒需要4-6周; 2、由于从选定菌落分离的重组病毒DNA不与亲本、非重组病毒混合,因此减...
Bac-to-Bac 表达系统精简Bac-to-Bac 表达系统 I. pFastBac-X 重组质粒的构建 利用分子生物学技术构建所需的 pFastBac 重组质粒,以 DH5α 为宿主,进行扩 增.(以下以 pFastBac-X 为例进行说明. II. pFastBac-x 重组质粒的转座步骤: 1. 制备 LB 琼脂平板。 LB 培养液(含 Agar):胰蛋白冻 10g/l,Nacl ...
Bac-to-Bac_表达系统精简 Bac-to-Bac 表达系统 I. pFastBac-X重组质粒的构建 利用分子生物学技术构建所需的pFastBac重组质粒,以DH5α为宿主,进行扩增.(以下以pFastBac-X为例进行说明. II. pFastBac-x重组质粒的转座步骤: 1.??制备LB琼脂平板。 LB培养液(含Agar):胰蛋白冻10g/l,Nacl 10g/l,酵母提取物 5g...