在这里,我们将采用类似于 Diffbind 中的方法,并在 ATACseq 分析中合理建立。 1. 识别非冗余峰 首先,我们将定义至少 2 个样本中存在的一组非冗余峰,并使用这些峰使用 DESeq2 评估无核小体 ATACseq 信号的变化。在这里,我们使用与 ChIPseq 相同的方法来推导差异的一致峰。 我们在所有样本中取峰并将它们减少为...
在这里,我们将采用类似于 Diffbind 中的方法,并在 ATACseq 分析中合理建立。 1. 识别非冗余峰 首先,我们将定义至少 2 个样本中存在的一组非冗余峰,并使用这些峰使用 DESeq2 评估无核小体 ATACseq 信号的变化。在这里,我们使用与 ChIPseq 相同的方法来推导差异的一致峰。 我们在所有样本中取峰并将它们减少为...
在peak calling之后,多个样本的开放染色质区域先被合并,然后通过估计开放染色质区域上reads的差异来进行差异分析。由于我们通常假定ATAC-seq数据的差异分析与RNA-seq很相似,所以诸如edgeR和DESeq2等用来分析差异基因表达的软件被广泛的用来进行ATAC-seq数据的差异分析。大多数开放染色质区域在两个条件下是相同的,只有一小...
5.分析参数:在进行peak calling、差异分析等步骤时,使用的软件和算法不同,导致结果存在偏差。6.生物...
ATAC-seq的数据分析主要是检测信号峰值,就是peaks,不同样品的peaks的差异主要是两个思路,使用韦恩图展现有无peaks的差异,另外就是使用散点图展现高低强弱的peaks差异。 现在是2021了,有了很多成熟的软件算法可以做peaks的差异分析,不过偶尔忆苦思甜也是有必要的ATAC-seq经典差异分析,让我们一起看看距离2013年的ATAC-se...
在这里,我们将采用类似于 Diffbind 中的方法,并在 ATACseq 分析中合理建立。 1. 识别非冗余峰 首先,我们将定义至少 2 个样本中存在的一组非冗余峰,并使用这些峰使用 DESeq2 评估无核小体 ATACseq 信号的变化。在这里,我们使用与 ChIPseq 相同的方法来推导差异的一致峰。
通过分析ATAC-Seq数据,可以获得转录因子结合位点以及可能被调控的靶基因的信息。 如果需要检测差异基因,通常需要结合其他基因表达谱分析技术,例如RNA-Seq。RNA-Seq是一种用于定量分析基因表达的技术,可以用于检测不同条件下基因表达水平的差异。通过将ATAC-Seq数据与RNA-Seq数据进行联合分析,可以更全面地研究基因表达调控...
差异结合亲和分析:DiffBind的核心功能是差异结合亲和分析,它可以识别样本间显著的差异结合位点。这一步骤包括将实验数据标准化,建立模型设计和对比(或contrasts)。接下来执行底层的核心分析,默认情况下使用DESeq2。这将为每个候选结合位点分配一个p值和FDR,表明它们的差异结合置信度。
1. 质控 ATACseqQC 库允许我们在一个步骤中运行我们已经看到的许多 ATACseq QC 步骤。它可能会消耗...
F. 基因表达及其pomoter区对应DAR的相关性分析。 4. 通过移除不需要的变量的方法来改进ATAC-seq差异分析 批次效应去除方法——RUVSeq(去除不需要的变化,R包)。 由于这个包经常使用在RNA-seq数据上,作者测试了RUVSeq包在两个ATAC-seq数据差异分析上的性能。