Chip-seq是实验前明确有一个感兴趣的转录因子,根据目标转录因子设计抗体去做Chip-seq实验拉DNA,验证感兴趣的转录因子是否与DNA存在相互作用;而ATAC-Seq一般用于不知道特定的转录因子,是在全基因组范围内检测染色质的开放程度,可以得到全基因组范围内的蛋白质可能结合的位点信息,用这个技术方法与其他方法结合是想去筛感...
ATACseq, MNaseseq and DNaseseq DNaseseq- 酶消化以从转录因子结合位点周围的开放染色质中提取信号。MN...
但ChIP-seq 技术实际存在一定的缺陷,例如甲醛交联效率较低,可能导致某些蛋白质无法交联到 DNA 上,或使许多无关蛋白质交联到 DNA 上,影响后续分析数据;此外,甲醛交联会触发 DNA 损伤应答机制,从而改变染色体组分,进而使 ChIP 结果产生偏向性,并且 DNA 与蛋白质交联复合物的稳定性也是一个问题。 根据有无甲醛交联步...
ATAC-Seq与ChIP-Seq的不同的是ATAC-Seq是全基因组范围内检测染色质的开放程度,可以得到全基因组范围内的蛋白质可能结合的位点信息,一般用于不知道特定的转录因子,用此方法与其他方法结合筛查感兴趣的特定调控因子;但是ChIP-Seq是明确知道感兴趣的转录因子是什么,根据感兴趣的转录因子设计抗体去做ChIP实验拉DNA,验证感...
ATAC-seq利用DNA转座酶(Tn5)切割开放的DNA区域并结合二代高通量测序技术来研究染色质开放性的技术。 ChIP-seq是研究蛋白质与DNA相互作用的经典实验方法。该技术广泛应用于组蛋白修饰、转录因子调控等相关领域的研究。 1. ATAC-seq与ChIP-seq异同 ATAC-Seq (Assay for Targeting Accessible-Chromatin with high-th...
1. ChIP-seqChIP-seq是结合染色质免疫沉淀和高通量测序的技术,用于检测特定DNA关联蛋白的位置。它通过抗体筛选目标蛋白与DNA的结合位点,涉及组蛋白修饰和转录因子调控。1.1 组蛋白修饰:组蛋白的N端尾部修饰(如甲基化、磷酸化、乙酰化等)影响染色质构型,从而影响基因表达。例如,H3K4me1与增强子区...
ChIP-Seq与ATAC-seq都是全基因组范围内检测染色质状态的技术,但它们的侧重点不同。ChIP-Seq侧重于研究特定转录因子或蛋白复合物的结合区域,而ATAC-seq则用于研究染色质的开放程度,通常不知道对应的转录因子。两者在实验原理、应用范围和优势上存在差异,选择使用哪一种技术取决于具体研究目的和实验需求。
1、染色质免疫共沉淀测序技术(ChIP-Seq) 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP),是研究体内蛋白质与DNA相互作用的经典方法。将ChIP与高通量测序技术相结合的ChIP-Seq技术,可在全基因组范围对特定蛋白的DNA结合位点进行高效而准确的筛选与鉴定,为研究的深入开展打下基础。
ATAC-seq的分析流程: 1、数据预处理 (1)比对前质量控制:FastQC可用于在测序数据中可视化碱基质量得分、GC含量、序列长度分布等。 (2)原始序列比对:将过滤的read比对到参考基因组。 (3)比对后处理和质量控制: 比对后处理就是去除重复序列和细胞器序列。
ATAC-seq与ChIP-seq区别在哪里?ChIP-seq是在实验前明确有一个感兴趣的转录因子,根据目标转录因子设计抗体去做ChIP实验拉DNA,验证感兴趣的转录因子是否与DNA存在相互作用;而ATAC-seq是在全基因组范围内检测染色质的开放程度,可以得到全基因组范围内的蛋白质可能结合的位点信息。如果做了ATAC-seq可以不...