在AS-PCR (ARMS) 的反应体系中,引物上标记2个不同荧光素,或加入荧光探针等方法都是以实时荧光PCR为 基础的基因分型方法。可检测出样品中含量低至〇. 1-1.0%的突变基因。目前,该方法已成 为国际上肿瘤个体化分子检测最重要、最先进的技术之一,其在临床应用中的优势已被业 内专家广泛认可。目前,全球只有两家...
图1A中,针对包含SNP位点的祀序列设计等位基因特异性引物 (下称AS引物)1 -1、1 -2,即,在常规PCR引物设计基础上,使待iiSNP位点恰好位于AS引物1 -1、1-2的3'末端,即引物1-1与1-2仅3'末端的碱基不同(分别对应野生型和可能的突变型), 其余碱基序列一致,其中5 '端X代表碱基上的径基或憐酸基,3 '端Y...
本发明的基因突变检测方法,采用上述AS-PCR引物和竞争阻断引物进行PCR扩增反应。本发明的试剂盒,包括AS-PCR引物、竞争阻断引物、TaqMan探针、内控引物、内控探针、聚合酶、dNTP和缓冲液。本发明的AS-PCR技术引物设计方法、基因突变检测方法及试剂盒,有效降低因突变位点强弱错配而导致的每个突变位点的AS-PCR引物特异性的...
1.一种AS-PCR引物的设计方法,所述方法包括以下步骤: (i)针对包含待测等位基因变异区域的靶序列设计AS-PCR引物; (ii)对步骤(i)所设计的AS-PCR引物进行修饰,在引物5’端1～8个碱基内标记一荧光基团,对等位基因变异区域的碱基用淬灭基团标记; (iii)在步骤(ii)所设计的AS-PCR引物3’端额外合成1～3个与待测...
表1为AS-PCR引物序列表 合成上述AS-PCR引物,PAGE纯化。 2、AS-PCR反应 分别提取野外捕获的编号为1-6的中华按蚊的基因组DNA,备用,得到编号为1-6的待测样本的DNA,分别将6种样品进行如下检测: AS-PCR设计为平行三管法:三个平行的PCR反应体系用于鉴定同一个体基因型,一个反应体系(A管)引物为CD1、CD2、Cgd3,另...
专利摘要:本发明提供了一种用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的AS‑PCR引物,所述AS‑PCR引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,所述反向引物如SEQIDNO:2所示;本发明还提供了用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的试剂盒,所述试剂盒包括所述的AS‑PCR引物;本发明还提供了采用所述...
摘要: 目的 通过改进AS-PCR引物,提高ABO基因型分型正确率.方法 把引物P1 3'末端第5位碱基由G改为C,其分型图谱与改进前进行对比分析.结果 改进AS-PCR引物后,OO型非特异产物减少,避免了将OO型误判为AO型.结论 引物P1 3'末端第5位碱基由G改为C后,可有效防止OO型被误判为AO型. ...
本发明提供了一种用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的AS‑PCR引物,所述AS‑PCR引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述反向引物如SEQ ID NO:2所示;本发明还提供了用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的试剂盒,所述试剂盒包括所述的AS‑PCR引物;本发明还提供了采用所述AS...
为了获得番茄抗病基因Ty-1的分子标记,利用特异引物对3份抗病纯合材料(基因型Ty-1/Ty-1)和3份感病纯合材料(基因型ty-1/ty-1)进行PCR扩增,抗病、感病材料均产生400bp的P... 李海涛,杜玉丽,张子君,... - 《中国蔬菜》 被引量: 14发表: 2012年 ...
a你为什么感觉很困? Why do you feel very sleepily?[translate] aPCR方法的建立,根据等位基因特异性PCR法(AS-PCR)的原理,设计一对特异引物,以含D816V突变的 pEGFP- C1- c-kit重组质粒为模板,通过普通PCR优化退火温度后再优化荧光定量PCR条件。 正在翻译,请等待...[translate]...