一、ARMS-PCR原理 ARMS-PCR的原理基于聚合酶链式反应(PCR)和特异性引物的设计。其基本步骤如下: 1.引物设计:设计特异性的引物,包括ARMS正向引物、ARMS逆向引物和内部控制引物。ARMS正向引物与ARMS逆向引物的3'端分别与基因突变位点的等位基因和野生型等位基因互补。内部控制引物与ARMS逆向引物的3'端互补,用于确定PCR...
常规PCR扩增DNA所用的上、下游引物与靶序列完全匹配,而等位基因PCR采用等位基因特异的两条上游引物,两者在3’端核苷酸不同(图1),一个对野生型等位基因特异(MP-F),另一个对突变型等位基因特异(Primer-R),在Taq DNA聚合酶作用下,与模板不完全匹配的上游引物将不能退火,不能生成PCR产物,而与模板匹配的引物体系则...
四引物法(ARMS-PCR)检测技术是一种用于检测核酸序列变异的高效方法。其原理主要基于引物的设计和PCR扩增技术。在该方法中,通过合理设计特定引物,实现对目标基因的突变或多态性位点进行检测。 对于要检测的位点,设计两对引物,其中一对引物是特异性引物(allele-specific primers),另一对引物是控制引物(external control ...
ARMS-PCR金磁纳米微粒层析法则是将ARMS-PCR原理与免疫层析方法相结合。ARMS特异引物的5’端标记地高辛,通用引物的5’端标记生物素,层析试纸条包括上样垫、 结合垫、 NC硝酸纤维素膜(膜上依次标记检测线T线和质控线C线)、支撑板和吸水纸五部分。金...
肺肠10基因ARMS-PCR法 肺癌是全国发病率和死亡率最高的癌种,同时也是靶向药物最多的癌种。依据2019年V5版NCCN指南,推荐检测的非小细胞肺癌靶标基因主要有EGFR、KRAS、BRAF、MET、HER2、ROS1、RET等。也就是说,绝大多数需要进行靶向用药检测的患者,推荐选择小套餐检测产品进行这些基因的检测。
ARMS-pcr方法引物的设计是关键,针对野生型设计的引物,扩增时会被突变的模板阻滞;而针对突变型设计的引物,扩增时会被野生型模板阻滞。引物3’末端碱基必须落在突变的位置上,以便能很好地判断突变是否发生。此外,ARMS技术在大多数情况下还会人为增加引物3’端附近引物的突变来提...
先用PCR方法扩增基因，然后用ARMS技术检测突变的基因 扩增阻滞突变系统（ARMS法，蝎形探针）：边扩增边检测 优势：敏感性高且污染几率小只扩增并检测突变的序列 不足：只针对已知突变试剂盒费用较高
ARMS-PCR法检测遗传性易栓症常见突变位点的引物探针组合及试剂盒”成果转化相关事项公示如下: 一、成果名称及简介 成果包含如下1项知识产权: 发明专利:一种基于ARMS-PCR法检测遗传性易栓症常见突变位点的引物探针组合及试剂盒 发明人:胡豫/邓君/唐亮/丁雅洁/梅恒 ...
目前,检测EGFR突变的方法包括Sanger测序,突变扩增系统(ARMS),焦磷酸测序,高分辨率熔解分析和高通量测序。Sanger测序仍然是临床实践中EGFR突变检测的金标准,并且可以检测到未知的EGFR突变。 研究目的 用Sanger测序法检测ARMS-PCR方法未检测到的潜在EGFR基因未知突变。