ARMS-PCR是一项在PCR基础上发展起来的新方法,可检测出DNA中各种点突变,是目前国际上肿瘤个体化分子检测最重要、最广泛应用的技术之一,其在临床应用中的优势已被业内专家广泛认可。 ARMS-PCR即扩增阻滞突变系统PCR(Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,...
ARMS PCR的工作原理 ARMS PCR引物设计时等位基因两条上游引物中3’端核苷酸不同,两条引物分别对野生型和突变型进行特异性扩增时,与模板不能完全匹配的上游引物将不能与模板完全形成互补碱基对,形成错配,一方面,碱基错配会影响产物延伸,另一方面,错配碱基会改变等位基因变体的退火温度,最终导致不同基因型扩增...
ARMS PCR的工作原理 ARMS PCR引物设计时等位基因两条上游引物中3’端核苷酸不同,两条引物分别对野生型和突变型进行特异性扩增时,与模板不能完全匹配的上游引物将不能与模板完全形成互补碱基对,形成错配,一方面,碱基错配会影响产物延伸,另一方面,错配碱基会改变等位基因变体的退火温度,最终导致不同基因型扩增效果的差...
ARMS-PCR的高特异性要求 从ARMS-PCR的原理上来看,该检测方法对PCR体系的特异性要求较高。保证特异性可以从以下两方面着手: 1 优化引物设计:常见手段之一是引入超过一个错配碱基,通常在3’端的倒数第二或第三位,与末端错配碱基共同作用,使不互补的扩增产物显著降低...
ARMS-PCR即扩增阻滞突变系统PCR( Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR),通过引物3’末端引物设计控制等位基因特异性延伸,并结合Taqman探针的方法检测荧光信号值,从而判断野生型等位基因和突变型野生基因。
ARMS-PCR即扩增阻滞突变系统PCR(Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR),是一项在PCR基础上发展起来的新方法,可检测出DNA中各种点突变,是目前国际上肿瘤个体化分子检测最重要、应用最广泛的技术之一,其在临床应用中的优势已被业内专家广泛认可。
ARMS-PCR技术 ARMS-PCR 扩增阻滞突变系统PCR (Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR)是Newton等首先建立用来检测已知突变的方法。 ARMS基本原理 如果引物的3′端碱基与模板碱基不互补,则用一般耐热DNA聚合酶无法延伸。因此根据已知点突变设计2条...
一、PCR基本原理 PCR是一种常用的分子生物学技术,通过DNA的复制来扩增目标序列。PCR反应主要包括三个步骤:变性、正反向扩增和延伸。 该问题没有给出题目,因此,文章将直接从arms-pcr技术的原理入手。 二、Arms-PCR的发展背景 Arms-PCR技术是DNA单核苷酸多态性(SNP)检测中的一种关键技术方法。SNP是人类基因组中最常...
网络突变;多聚链酶式扩增;扩增系统 网络释义