Annexin V 细胞凋亡检测原理 磷脂酰丝氨酸(PS)是一种带负电荷的磷脂,在正常细胞中,PS分布于细胞膜脂质双层的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜上这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V 是一种Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,在高钙环境下,Annexin V高亲和力结合PS,通过检测标记Annexin V的荧光...
2、选择Annexin-V的荧光染料时要考虑细胞的自发荧光,特别是培养时间久或药物处理的细胞,一定注意细胞代谢物药物本身的荧光,一般来说细胞代谢物的自发荧光会干扰FITC/PE,所以可建议用Annexin-V APC,药物的干扰可查看药物本身的发射光谱是否会对检测选择的染料有影响。3、细胞染色完成后,禁止固定,尽快检测完,可将...
A以Annexin V-FITC/PI双染为例,凋亡前期的细胞只带FITC荧光,凋亡后期及坏死细胞除FITC荧光外还会带PI荧光,从流式和荧光显微镜结果来看的话见下图示例: 左图:SF9细胞(SNL-170)高密度培养24h后通过Annexin V-FITC染色检测,采用荧光显微镜观察(白光+FITC荧光+PI荧光三色合成图片),无荧光为正常细胞,FITC荧光(绿色)为...
01实验原理 Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(PS)高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期,只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)翻向外侧,用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针,并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用,能够准确区分正常细胞、凋亡早期和...
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,是细胞凋亡检测实验中最常用的一种探针组合。 [检测原理] 在细胞凋亡早期阶段,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)从胞质转至胞外,暴露在细胞外环境中,细胞膜通透性增加,从而被PS特异的Annexin-V探针标记。
实验笔记丨流式检测细胞凋亡之Annexin V 检测细胞凋亡Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期凋亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发…
离心洗涤,再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例,增加早期凋亡细胞比例。3,由于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白,只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大,因而在消化细胞时,建议一般不采用含EDTA的消化液。4,必须设置阴性对照和补偿对照(分别单染)。
一、Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测方法 原理:在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法,即检测细胞膜完整性,可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测,目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理:Annexin V可与磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合,因此,可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
Procell自主研发的荧光双染细胞凋亡检测试剂盒用于鉴定凋亡和坏死细胞。 Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V 标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。