细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式,对于维持生物体的正常生理功能至关重要。Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。在Annexin V-F...
将Annexin V与PI联合使用时,PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性。 图1. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测原理 流式细胞仪分析: FITC最大激发波长为488 nm,最大发射波长525 nm,FITC的绿色荧光在FL1通道检测; PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm,最大...
Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了荧...
Annexin-V为Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS有极强的结合力。PI是一种经济、稳定的核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。将Annexin V与PI联合使用时,PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色...
一、Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测方法 原理:在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。
因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置;4 正常细胞:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (-);...
A以Annexin V-FITC/PI双染为例,凋亡前期的细胞只带FITC荧光,凋亡后期及坏死细胞除FITC荧光外还会带PI荧光,从流式和荧光显微镜结果来看的话见下图示例:左图:SF9细胞(SNL-170)高密度培养24h后通过Annexin V-FITC染色检测,采用荧光显微镜观察(白光+FITC荧光+PI荧光三色合成图片),无荧光为正常细胞,FITC荧光...
PI/Annexin V-FITC检测细胞凋亡之原理及注意事项 Jingle进哥 4180 0 医学生必备|细胞凋亡检测实验,PI染色,Hoechst染色,细胞增殖 酸菜教科研 7234 2 流式细胞凋亡检测试验 舍为斯生物 4742 0 活死细胞双染步骤 安静基础科研实验外包 5165 0 TUNEL染色、PI染色、细胞增殖、细胞迁移,细胞凋亡检测实验 酸菜教科研...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡(图1):图2:用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时,清洗,然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2,左),而staurosporine实验组...