在Annexin V-FITC/PI双染法中，Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸（PS）的蛋白。当细胞发生凋亡时，PS会从细胞内转移到细胞膜外侧，这使得Annexin V能够与之结合。通过使用FITC标记的Annexin V，可以在荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞的绿色荧光信号。与此同时，碘化丙啶（PI）是一种能够穿...
Annexin V-FITC/PI法的原理： 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜，此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine，PS)位于细胞膜的内侧，当细胞发生凋亡时，细胞膜的结构发生改变，这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面，这种现象在凋亡的早期就会出现，因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了荧...
因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 检测方法: 1.按照既定程序诱导细胞凋亡。
实验流程：（1）收集细胞：在进行完细胞凋亡刺激后，用预冷的PBS洗涤细胞2次，4℃离心5min，（贴壁细胞使用不含EDTA的胰酶消化）；（2）重悬细胞：取1～5×105个重悬的细胞，离心弃掉PBS，加入Annexin V-FITC结合液轻轻重悬；（3）染色：加入Annexin V-FITC和PI Staining Solution，轻轻混匀；（4）孵育：避光、...
PI/Annexin V-FITC检测细胞凋亡之原理及注意事项 Jingle进哥 4180 0 医学生必备|细胞凋亡检测实验,PI染色,Hoechst染色,细胞增殖 酸菜教科研 7234 2 流式细胞凋亡检测试验 舍为斯生物 4742 0 活死细胞双染步骤 安静基础科研实验外包 5165 0 TUNEL染色、PI染色、细胞增殖、细胞迁移,细胞凋亡检测实验 酸菜教科研...
晚期凋亡细胞: Annexin ⅴ-FITC (+);PI (+); 机械性坏死:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (+); 5 对照组凋亡比例高的原因: 细胞状态不好; 细胞收集后存放的时间太长,没有及时染色; 细胞表面原有的PS相对较多,应选用低浓度的AnnexinV标记; PBMC表面往往有血小板黏附在细胞表面,造成Annexin V阳性率偏高; ...
未染色组：不加抗体 Annexin V单染组：将细胞置于55℃水浴中处理10分钟，或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，随后加入5μl Annexin V-FITC。PI单染组：取一半细胞加入4%多聚甲醛（使细胞死亡），离心后用PBS洗涤，再与正常活细胞混合，并加入5μl PI。Annexin V和PI双染组：同样进行55℃水浴处理或加入凋亡诱导剂...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡(图1) : 图2:用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时,清洗,然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2,左),而staurosporine实验组在54...
Annexin V-EGFP的绿色荧光通过FITC通道(FL1)检测;PI红色荧光通过PI通道(FL2或FL3)检测,建议使用FL3。 荧光补偿调节:使用未经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 三、注意事项 1. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。
艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒还提供了碘化丙啶（PI），PI可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现紅色荧光,用 Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活细胞不被Annexin V-FITC和PI染色;凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈阴性;坏死細胞和凋亡晚期的细胞可以同时被...