Annexin V/PI双染色法的缺点 1、制备贴壁细胞样品时，容易因消化和吹打造成细胞额外损伤，从而夸大了实验结果，增加了数据变异度。2、凋亡细胞的本底荧光或非特异染色的特性会增强，导致荧光飘移，导致定量不准。实验交付内容 1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；2、检测报告与结果分析（流式...
医学生必备|细胞凋亡检测实验,PI染色,Hoechst染色,细胞增殖 酸菜教科研 7234 2 流式细胞凋亡检测试验 舍为斯生物 4742 0 活死细胞双染步骤 安静基础科研实验外包 5165 0 TUNEL染色、PI染色、细胞增殖、细胞迁移,细胞凋亡检测实验 酸菜教科研 4001 0 细胞凋亡检测,PI染色,V-P染色实验,医学生必学技术 酸菜教...
实验的解决方法：先低速离心，吸取细胞培养板中的液体，留少许液体，加入适量PI和Annexin-V染色10min后，将漂浮细胞吸至离心管中，离心洗涤两次，用PBS漂洗贴壁细胞两次，加胰酶消化后将细胞悬液移至另一离心管中，离心洗涤，再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例，增加早期凋亡细胞...
因此,可以建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。 2、实验材料、试剂、仪器和耗材 细胞; HEPES缓冲液、NaCl、CaCl2、PI、ANNEXIN V-FITC试剂盒; 流式细胞仪。 3、实验步骤 一、试剂与仪器 孵育缓冲液:10 mmol/L HEPES/NaOH,pH7.4,140 mmol...
实验设计通常包括未染色组、Annexin V单染组、PI单染组以及Annexin V-PI双染组（涵盖阴性对照、空白对照和各实验组）。每个组别至少设置3个复管，以确保数据的准确性。随后，利用专用软件如Flow Jo等对流式细胞仪收集的数据进行分析，从而得出各象限中凋亡细胞的占比。在完成3次独立重复实验的数据分析后，进行统计...
早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整,PI无法进入凋亡细胞。 将Annexin V与PI联合使用,即可将处于不同凋亡时期的细胞区分开来:活细胞(Annexin V-/PI-)、早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)、晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Annexin V和PI结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 图Annexin V/PI检测原理 服务流程 服务...
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法，即检测细胞膜完整性，可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测，目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理：Annexin V可与磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合，因此，可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡是最常用的检测细胞凋亡的方法之一。在细胞开始早期凋亡时, 磷脂腺丝氨酸会外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。例如,用绿色荧光探针 YF488 标记的 Annexin V,它可以结合外翻的磷酯酰丝氨酸,从而检测细胞凋亡的重要特征。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种 DNA 结合染料,它可以...
Annexin V/PI双染色法 原理 细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细...
在Annexin V-FITC/PI双染法中，Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸（PS）的蛋白。当细胞发生凋亡时，PS会从细胞内转移到细胞膜外侧，这使得Annexin V能够与之结合。通过使用FITC标记的Annexin V，可以在荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞的绿色荧光信号。与此同时，碘化丙啶（PI）是一种能够...