15min,随后置于冰上;(5)检测:①流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光(激发波长488nm,发射波长525nm),PI为红色荧光(激发波长535nm,发射波长为615nm);②在荧光显微镜下用双色滤光片观察,Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。结果判断:图2 不同处理条件下Annexin V/PI双染流式法...
(5)检测:①流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光(激发波长488nm,发射波长525nm),PI为红色荧光(激发波长535nm,发射波长为615nm);②在荧光显微镜下用双色滤光片观察,Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。 结果判断: 图2 不同处理条件下Annexin V/PI双染流式法检测的细胞凋亡情况(Ribeiro et ...
细胞带绿色荧光(如:GFP)可以根据流式细胞仪的配置来选择合适的试剂盒:·流式细胞仪有DAPI通道,选择Annexin V-APC/DAPI(E-CK-A258)试剂盒;·流式细胞仪没有DAPI通道,选择Annexin V-APC/7-AAD(E-CK-A218)试剂盒。细胞带红色荧光(如mcherry/RFP)可以选择Annexin V-APC/DAPI(E-CK-A258)试剂盒。c...
4、流式细胞仪定量分析(目前较为常用的方法,也是本期学习的主要内容)细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞术检测细胞悬液中细胞荧光强度来区分...
因此Annexin V作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将AnnexinⅤ进行荧光素FITC标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙锭(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜使细胞核染红。因此将...
8、1小时内上流式细胞仪测定结果。 结果分析 以下4 个样本分别是阴性对照、Annexin V 单阳管、PI 单阳管和试验管。 Annexin V Blocking 待测细胞与未标记的重组 Annexin V 预孵育,然后进行实验,是 Annexin V 细胞凋亡检测的质量控制。原理是预先阻断 Annexin V-FITC 的结合位点,这样可以证明 Annexin V-FITC ...
AnnexinV-FITC 250 μl 产品简介 AnnexinV-FITC/PI 凋亡检测试剂盒是一种采用AnnexinV-FITC 与 PI 双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷...
细胞凋亡检测实验(AnnexinV/PI双染色法)细胞凋亡检测可以:(1)用于肿瘤细胞和组织在内的丌同种类病理标本研究;(2)应用于临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有丼足轻重的地位。1、实验方法和原理细胞凋亡早期改变发生在细胞...
用流式细胞仪分析。膜联蛋白V-FITC在494nm处极佳激发,在519nm处发射(通常在FL1中读取)。PI在536nm处极佳激发并且在617nm处具有峰值发射(通常在FL3中读取)。艾美捷ImmunochemistryAnnexin V-FITC凋亡检测试剂盒组分:Annexin V-FITC, 200X, 50 µL, 1 vial, #6340 10X Binding Buffer, 1.7 mL, 3 ...
Annexin-V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的 Annexin-V 作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。另外,碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的...