PI/Annexin V-FITC检测细胞凋亡之原理及注意事项 Jingle进哥 4180 0 医学生必备|细胞凋亡检测实验,PI染色,Hoechst染色,细胞增殖 酸菜教科研 7234 2 流式细胞凋亡检测试验 舍为斯生物 4742 0 活死细胞双染步骤 安静基础科研实验外包 5165 0 TUNEL染色、PI染色、细胞增殖、细胞迁移,细胞凋亡检测实验 酸菜教科研...
Annexin V-FITC/PI法的实验步骤：1，细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬细胞并计数。2，取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。3，细胞悬液中加入...
Annexin V标记有荧光团或生物素，可通过与外叶PS结合识别凋亡细胞。碘化丙啶（PI）是一种荧光核染料，对活细胞和凋亡细胞不敏感，但对死细胞有红色荧光染色，与细胞内的核酸结合紧密。Annexin V-EGFP/PI双染细胞凋亡检测试剂盒为细胞凋亡提供了一种快速简便的检测方法。在提供的结合缓冲液中，用Annexin V-EGFP和PI...
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡实验方法 1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300×g离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。2.取1~5×105重悬的细胞，300×g离心5 min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入100 μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer 重悬细胞。3.细胞悬液...
1、Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。(三) 获得含重组表达质粒的表达菌种 1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α...
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法，即检测细胞膜完整性，可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测，目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理：Annexin V可与磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合，因此，可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
但当细胞进入晚期凋亡或死亡阶段时，其细胞膜的完整性会受到破坏，从而使得PI能够穿透细胞膜并使细胞核染红。接下来，我们将详细介绍Annexin V/PI双染法的具体步骤首先，你需要准备必要的试剂盒，包括Annexin V-FITC、Propidium Iodide（PI）以及10×Annexin V Binding Buffer。此外，根据实验标本的不同，你可能还需要...
同时，通过分析 PI 染色的直方图，还可以得到细胞周期的分布情况，计算出 G1 期、S 期、G2 期细胞的比例。Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡 / 周期检测试剂盒的检测方法，虽然步骤较多，但只要严格按照流程操作，就能精准揭示细胞凋亡与周期的奥秘，为生命科学研究提供有力的数据支持。
一、检测原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜的磷脂双分子层的内侧,在细胞发生凋亡的早期,就会出现PS由脂膜内侧翻向外侧的现象。Annexin V作为一种Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,与PS有高度亲和力,可以与暴露在膜外侧的PS结合。因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。
Annexin V-FITC 用药物处理过的细胞株或目标细胞 碘化丙啶(PI)(0.5mg/ml) 磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4) 〖设备〗 亮场显微镜 流式细胞仪 〖方法〗 整体流程如下,左边的数字代表下面的步骤,中间的文字代表流程内容,右边是代表耗时。 1、诱导细胞凋...