1)对于荧光染料的选择,建议如果流式细胞仪带有 488 nm 和 633 nm 两个或以上激光管,首先考虑用 APC 或 YF647 标记 Annexin V,因为它和 PI 通道几乎不用考虑光重叠问题,可以减少调节补偿的烦恼,如果只有 488 nm 激光管则可选择YF488/FITC 标记的 Annexin V。 2)再次需要考虑细胞是否自带荧光,因为感染病毒或...
4.取细胞悬液(细胞总数为1-5×10 ⁵cells)加入荧光标记的Annexin V和碘化丙啶 (PI)轻轻混匀，室温避光孵育15min。5.染色孵育后，立即进行流式细胞仪检测或荧光显微镜检测。流式细胞仪检测时，以Annexin V-FITC为例，可使用FITC通道(通常是FL1)检测Annexin V-FITC。PE通道(通常是FL2)检测PI。用流式软件进...
A以Annexin V-FITC/PI双染为例，凋亡前期的细胞只带FITC荧光，凋亡后期及坏死细胞除FITC荧光外还会带PI荧光，从流式和荧光显微镜结果来看的话见下图示例：左图：SF9细胞（SNL-170）高密度培养24h后通过Annexin V-FITC染色检测，采用荧光显微镜观察（白光+FITC荧光+PI荧光三色合成图片），无荧光为正常细胞，FITC荧光...
Annexin V 细胞凋亡检测原理 磷脂酰丝氨酸（PS）是一种带负电荷的磷脂，在正常细胞中，PS分布于细胞膜脂质双层的内侧，当细胞发生凋亡时，细胞膜上这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V 是一种Ca2+依赖的磷脂结合蛋白，在高钙环境下，Annexin V高亲和力结合PS，通过检测标记Annexin V的荧光...
Annexin-V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。用荧光素（FITC、Alexa Fluor488等）标记的Annexin-V作为探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和...
表一：Annexin V 凋亡实验流式上机对照设置 注意事项 ① 单阳对照组细胞，一定要使用确定有凋亡的细胞，因为调节补偿需要有足够的阳性信号。② 如果细胞带自发荧光，空白对照和单阳对照需要用不带自发荧光的细胞，另外需要再增加一管带荧光但不加任何染料的细胞做单阳对照。细胞带绿色荧光（如：GFP）可以根据流式细胞...
我们提供单独试剂或易用试剂盒形式的Annexin V ,可结合其他染料使用,通过流式细胞术评估凋亡和非凋亡混合细胞群。
我们提供单独试剂或易用试剂盒形式的Annexin V ,可结合其他染料使用,通过流式细胞术评估凋亡和非凋亡混合细胞群。
左下象限(Annexin V-/PI-):左下象限为正常的活细胞; 右上象限(Annexin V+/PI+):右上象限为晚期凋亡细胞或坏死细胞,细胞膜损伤的细胞DNA可被PI着染产生红色荧光; 右下象限(Annexin V+/PI-):右下象限为早期凋亡细胞,在细胞凋亡的早期PI无法着染,不会产生红色荧光信号。