根据Actin的功能和组织定位的不同,主要分为三类:α-肌动蛋白(α-actin)、β-肌动蛋白(β-actin)和γ-膜肌动蛋白(γ-smooth muscle actin)。α-actin存在于肌肉组织中,包括平滑肌和心肌,参与了细胞的收缩和肌肉运动;β-actin广泛存在于细胞各个部位,包括细胞质和细胞骨架,它参与了多种细胞活动,如细胞...
因此内参还被称为上样参照(Loading Control)。 2. 常用内参介绍 GAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶,是糖酵解过程中将3-磷酸甘油醛进一步磷酸化的酶;表达量相对恒定,但代谢信号通路受影响时不适用GAPDH。 actin:肌动蛋白,细胞骨架蛋白;可分为三类α-actin、β-actin和gama actin;细胞生长条件的改变以及与胞外基质组分的...
在WB 实验中,内参是用于校正样品加载量和检测过程中可能出现的变异性的关键因素。传统的内参,如 Actin 或 Tubulin,因其在细胞中相对稳定的表达水平而被广泛使用。但一个 Actin 可能不灵,特别是在细胞类型、生理状态或病理条件改变时,这些传统内参的表达水平也可能发生变化。 例如论文中 Figure 5 中展示的 H 图。...
actin作为内参的原理 Actin作为内参是一种研究参考基因的方法,它通过序列保守性测定基因组中某些基因的表达水平来衡量基因组数据的可靠性。1.Actin作为内参的定义:Actin作为内参是指为了衡量基因组数据的可靠性,使用序列保守性来测定从基因组中提取的某些基因的表达水平作为参考。2.Actin作为内参的用处:Actin作为内参...
GAPDH,Tubulin,Actin是WB实验中最常用的三种上样内参(loading control),因被认为表达水平受环境因素影响较小,在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达或变化很小,所以被称为管家基因(house-keeping genes),是WB实验中校正上样量、检测上样过程中存在实验误差,保证实验结果准确性必不可少的。
Actin是一种高度保守的蛋白质,存在于所有真核细胞中,包括动物、植物和真核微生物。它是细胞骨架的重要组成部分,参与细胞的各种运动和形态变化。Actin通过与肌动蛋白结合形成肌纤维,在肌肉收缩中发挥重要作用。此外,Actin还参与细胞内运输、细胞质分裂和细胞外基质的重塑等生物学过程。 Actin蛋白质由两种主要亚型组成,即...
actin作为内参的原理如下:Actin是一种细胞骨架蛋白,它在许多生物体的细胞中起着关键作用。在某些实验中,使用Actin作为内参物质,是为了对实验中基因表达水平的变化进行校正。Actin作为内参物质的原理在于:Actin基因的表达在不同细胞中是相对稳定的,因此它可以在实验中被用作一个参考基因,来比较其他基因...
β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能,分布广泛。 β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达...
不同的细胞类型和实验目的可能需要不同的内参。在做多组织多细胞样本对比表达量时,最好选用GAPDH作为内参,因为GAPDH是代谢类蛋白,在活组织中表达比较恒定。而beta Actin和beta Tubulin是结构蛋白,不同组织的细胞结构会有差异性。建议事先进行文献查阅和预实验,以确定哪种内参在您的实验条件下最为稳定。没有一个...
探索WB实验中的上样内参:GAPDH、Tubulin与Actin的选择指南 欢迎来到“医学科研小坑”公众号,这里我们将深入探讨三种常用WB内参:GAPDH、Tubulin和Actin。这些“管家基因”因稳定表达,常用于校准实验误差,确保结果的准确性。然而,它们各有特性,如何选择?让我们一起揭秘吧!首先, Actin,作为肌动蛋白...