多种技术进步已经增进了我们对AAV感染(或载体转导)的理解。siRNA敲减筛选是首先识别出多种宿主因子的方法,包括干扰素反应、DNA修复、细胞检查点、RNA剪接和SUMOylation。令人惊讶的是,siRNA敲减对转导只有适度的影响,筛选也没有突出当时的候选细胞核心受体。 敲除筛选...
如果没有糖基,那么报道的核心受体(如FGFR1、HGFR、EGFR、PDGFR、LamR和alphaVbeta5整合素)是主要的特异性介导者吗?我们尝试将核心受体外细胞结构构建与AAV2体外结合,并通过siRNA敲除进行转导抑制,但未成功。实验并不全面,对负面结果的原因也不明确,但对这些核心受体的角色越来越担忧。后来,CRISPR-Cas9敲除表明核心受体...
还可以通过rAAV将干扰与肿瘤生长和转移相关因子的siRNA导入肿瘤细胞来阻断肿瘤的生长和转移,如VEGF因子等。 图3. RNAi和miRNA的示意图 表1. 利用RNAi治疗肿瘤的临床研究实例 4.抗体药物 由于单抗的高度特异性和对肿瘤靶点的亲和性,单抗药物在肿瘤治疗中效果显著。通过rAAV将单抗基因导入体内,使其在体内直接产生抗体...
基因过表达是将目的基因的编码区克隆到相应的工具病毒载体上,导入细胞使基因实现大量转录和翻译,从而实现目的基因的过表达。此外,还可选择报告基因进行目的基因表达的追踪。RNA干扰 (RNA interference, RNAi)技术通过将与内源mRNA同源的小片段(19-23 bp)外源双链 RNA(siRNA)导入细胞中,引发细胞中相应mRNA高效特异性降...
文章所涵盖的服务包含过表达/干扰质粒构建、慢病毒、腺相关病毒AAV、CRISPR/Cas9基因敲除、细胞株构建、荧光素酶报告基因等，此外还有荧光素底物（如钾盐），脂质体转染试剂，慢病毒包装和浓缩试剂盒，siRNA等常用科研类试剂。本篇精选了二季度新发的部分高质量文章，让我们一起追踪最新的医学研究进展！慢病毒 & 细胞...
2023年,来自于Alnylam Pharmaceuticals的研究团队在设计了一种RNAi调节器,使用化学修饰的siRNA结合物或shRNA表达载体靶向肝细胞以沉默AAV转基因表达,研究团队通过体外和体内实验验证了该自我调节的AAV载体系统的有效性,插入TTR shRNA可实现基因表达的抑制。 在这一研究中,研究团队设计了一种嵌入TTR shRNA的AAV载体,编码...
文章所涵盖的服务包含过表达/干扰质粒构建、慢病毒、腺相关病毒AAV、CRISPR/Cas9基因敲除、细胞株构建、荧光素酶报告基因等,此外还有荧光素底物(如钾盐),脂质体转染试剂,慢病毒包装和浓缩试剂盒,siRNA等常用科研类试剂。 本篇精选了二季度新发的部分高质量文章,让我们一起追踪最新的医学研究进展!
2型腺病毒相关病毒(AAV-2)载体介导siRNA阻断基因表达的实验研究博士学位论文中文摘要 转录后在第2个U后切开,产生一3’uu突出的类似siRNAs结构的双链RNA。 本研究首先尝试利用质粒载体介导RNAi,来抑制报告基因Fluc和EGFP。PCR 扩增获得人U6基因启动子;三片段连接法构建了FlucshRNA转录质粒 ...
上一篇另辟蹊径:通过鼻腔将AAV高效递送到大脑,绕过血脑屏障下一篇新靶点+新载体:黎松团队通过siRNA联合化疗,增强抗肿瘤免疫反应 阅读原文喜欢此内容的人还喜欢 Nature子刊:仅3个月模拟禁食,让生物学年龄年轻2.5岁 生物世界 不喜欢 不...
研究人员通过药理学抑制 ATM 和 ATR 激酶,发现 ATM 抑制可减少 γH2AX/VG 共定位,而 ATR 抑制对其无影响,但两者均能增加转基因表达。同时,ATR 抑制对细胞周期有一定影响,但与 siRNA 敲低 Rad51 对细胞周期的影响不同。此外,ATR 抑制对 LacI 焦点数量影响较小,但能显著增加具有 LacI 焦点的细胞比例。