载体：AAV-hSyn-mCherry-IRES-WGA-Cre 病毒滴度：4.28E+12 VG/mL 注射体积：300nl 观察时间：4周 1.8 皮层&AAV干扰（AAV-shRNA）客户发表文章：Nature Medicine. (IF=22.864). Cao X,et.al. (2013). Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors.[腺相关病毒, 抑郁症]注射部位：小鼠...
Koch等采用大鼠视神经夹伤模型,玻璃体内注射AAV-RhoA-shRNA, RhoA表达下调,RGCs存活率及轴突再生能力显著提高。 图7 AAV-RhoA-shRNA的载体结构图及体外表达显著下调RohA的蛋白表达水平 图8 视神经挤压后敲降RohA的表达促进了轴突末端的再生 图8 视神经切断后敲降RohA的表达促进了视网膜结细胞RGCs的存活 4. AA...
shRNA干扰AAV载体是什么? AAV重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中,位于两个反向重复序列(ITRs)之间的DNA片段与辅助质粒表达的病毒蛋白进一步包装成病毒颗粒。当病毒转导宿主细胞时,两个ITR之间的外源DNA及病毒基因组一起进入细胞,线性双链DNA基因组以游离DNA的形式存在于细胞核中。由人类...
我们的腺相关病毒(adeno-associated virus,简称AAV)shRNA干扰载体系统是一种非常高效的能稳定在体内和体外干扰各种哺乳动物细胞靶基因表达的载体工具。AAV的免疫原性极低,在体内几乎没有致病性,使得AAV成为许多动物研究的理想工具。 AAV重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中,位于两个反向重复...
1.基因功能研究:RNAi具有高效特异性抑制基因表达的特点,运用AAV介导shRNA干扰可以调控基因表达,进而研究基因功能; 2.信号通路研究:AAV介导shRNA干扰具有宿主范围广,干扰能力强,持续时间长等特点,可以运用该技术进行体内体外相关信号通路及作用机制的研究; 3.构建疾病模型:通过AAV介导shRNA干扰可构建转基因小鼠模型; ...
将目的基因的CDS区构建到AAV载体，注射到动物体内实现过表达；（2）基因干扰表达。将针对目的基因设计的shRNA构建到AAV载体，注射到动物体内实现干扰表达；（3）目的基因敲除。将针对目的基因设计的sgRNA和Cas9编码序列分别构建到AAV载体中，注射到动物体内实现基因敲除；（4）内源过表达。将针对目的基因设计的sgRNA和d...
1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体，注射到动物体内实现过表达。2. 基因干扰表达。将针对目的基因设计的shRNA构建到AAV载体，注射到动物体内实现干扰表达。3. 目的基因的敲除。将针对目的基因设计的gRNA和Cas9编码序列分别构建到AAV中，注射到动物体内实现基因敲除。4. 内源过表达。将针对目的基因设计的...
为了测试 PacBio SMRT 测序是否可以对AAV载体基因组的全长进行单分子测序,研究人员使用了三个 scAAV 基因组(图1 A)。第一个是含有由鸡-β-肌动蛋白/CMV 启动子 (scAAV-EGFP) 驱动的 EGFP 转基因的常规 scAAV 载体。第二个和第...
侯爱生等通过构建表达shRNA的rAAV载体,建立了一种敲减小鼠海马EAAT3表达的动物模型,为进一步研究EAAT3调控机制和相关分子信号通路打下研究基础。邢梦瑶等通过rAAV9介导的RNA干扰能有效抑制H9c2细胞NF-κB p65基因的表达,抑制p65基因表达对H9c2细胞活力无明显抑制,但能减少Ang Ⅱ诱导的细胞凋亡。
图八所示为汉恒生物客户在《Acta Pharmacologica Sinica》杂志上发表的题为“Dihydroartemisinin suppresses renal fibrosis in mice by inhibiting DNA-methyltransferase 1 and increasing Klotho”的文章,使用AAV9通过肾盂注射法将shRNA输送至肾脏组织,实现肾脏局部特异性敲低Klotho的目的(注射参数:载体为AAV9,病毒滴度2 ...