常见的 AAV 病毒载体都是顺向标记，极少能进行逆行传递，这大大限制了 AAV 载体在神经环路示踪中的应用。直到 2016 年，研究人员在 AAV2 的基础上，通过定向进化的方式改造出一种具有逆向示踪功能的 AAV2 突变体——AAV2-retro，该载体能够在小鼠大脑中进行有效的神经环路逆向标记，且其逆行示踪能力和效率与传统的...
可逆向示踪的血清型 — AAV2-retro 利用神经示踪工具实现对神经环路的精确标记,主要涉及两大基本问题即方向性(顺向、逆向)和是否跨突触。顺向(Anterograde)是由注射部位的神经元胞体经轴突下行至末梢,逆向(Retrograde)则是由轴突末梢传到细胞体;顺向跨突触是从胞体传到轴突末梢后跨过突触传递至下一级神经元,逆向跨突...
在这样的背景下,AAV2-retro应运而生。2016年,发表在神经科学领域权威期刊Neuron上的文章,描述了这种AAV2-retro病毒的构建方法及其应用。 这种AAV具有非常高效的逆行标记能力,比一般的血清型的逆行标记能力高的多,甚至高于常用的逆行标记染料Fluoro-Gold(图...
测试信息 测试结果 结果评估AAV/Retro型荧光蛋白病毒BC-0027注射在C57BL/6小鼠BPN脑区,待表达21d后,取材观察可见注射位点及上游脑区有绿色荧光信号,说明该病毒表达正常,并实现逆行标记。 测试:杨鑫 审核:李…
目前可做逆行标记的只有Retro血清型,是Alla Y. Karpova等人获得的AAV2的突变体,其逆行标记是非跨突触的(图1),因此当探究某一脑区神经纤维投射来源时可以用该血清型。 基因操控工具 这类应用中可供选择的血清型较多,不同血清型的扩散能力以及对不同部位或细胞的感染能力不同,目前常用的血清型有:1、2、5、6、...
下面就来介绍一种可逆向示踪的血清型——AAV2-retro。 2016年,研究人员在AAV2的基础上,通过定向进化的方式改造出一种具有逆向示踪功能的AAV2突变体——AAV2-retro,该载体能够在小鼠大脑中进行有效的神经环路逆向标记,且其逆行示踪能力和效率与传统的逆行示踪剂相当。下图所示为rAAV2-retro的开发过程及应用实例: ...
病毒产品:维真生物-AAV(retro)-hSyn-GFP; 注射方法:局部注射小鼠脑室某区; 病毒滴度:4.77×10E13VG/mL; 注射量:100nL; 取材时间:注射后2周取材拍摄; 结果:病毒被轴突吸收,逆行到胞体,到达海马CA1区,得到了十分满意的实验结果 【维真生物-AAV病毒应用】注射位点 ...
rAAV2-retro通过逆行途径获得的转基因表达水平足以用于神经环路功能示踪,以及对神经元基因组的靶向操作。因此,通过选择性监测和操作连接不同脑区的投射神经元,rAAV2-retro有望为神经环路如何促进大脑发挥功能提供深入见解,并可能为神经退行性疾病的治疗干预奠定基础。
载体：AAV2/1-retro-Syn-eYFP-Cre、AAV2/8-CaMKIIα-DO-SK2&AAV2/8-CaMKIIα-DIO-SK2-mCherry 注射体积：300nl 观察时间：4周 1.6 初级运动皮层&顺向跨突触（rAAV2/1）Nature Neuroscience. (IF=19.912). Yao J,et.al. (2018). A corticopontine circuit for initiation of urination. [腺相关病毒...
据报道,目前适用于神经系统的AAV血清型有:1、2、5、6、8、9、PHP.B、PHP.eB、PHP.S、DJ、Retro、rh10等十几种,不同的血清型在神经系统不同部位的感染效率及扩散能力不同,合适的血清型关乎基因是否能够实现高效稳定表达,甚至关乎最终的研究结果,因此综合标记的细胞和...