常见的 AAV 病毒载体都是顺向标记，极少能进行逆行传递，这大大限制了 AAV 载体在神经环路示踪中的应用。直到 2016 年，研究人员在 AAV2 的基础上，通过定向进化的方式改造出一种具有逆向示踪功能的 AAV2 突变体——AAV2-retro，该载体能够在小鼠大脑中进行有效的神经环路逆向标记，且其逆行示踪能力和效率与传统的...
在这样的背景下,AAV2-retro应运而生。2016年,发表在神经科学领域权威期刊Neuron上的文章,描述了这种AAV2-retro病毒的构建方法及其应用。 这种AAV具有非常高效的逆行标记能力,比一般的血清型的逆行标记能力高的多,甚至高于常用的逆行标记染料Fluoro-Gold(图...
直到 2016 年,研究人员在 AAV2 的基础上,通过定向进化的方式改造出一种具有逆向示踪功能的 AAV2 突变体——AAV2-retro,该载体能够在小鼠大脑中进行有效的神经环路逆向标记,且其逆行示踪能力和效率与传统的逆行示踪剂相当。下图所示为 rAAV2-retro 的开发过程及应用实例: rAAV2-retro(逆向非跨突触标记) (Tervo ...
图1、rAAV2-retro(逆向非跨突触标记)(Tervo et al., Neuron, 2016) rAAV2-retro通过逆行途径获得的转基因表达水平足以用于神经环路功能示踪,以及对神经元基因组的靶向操作。因此,通过选择性监测和操作连接不同脑区的投射神经元,rAAV2-retro有望为神经环路如何促进大脑发挥功能提供深入见解,并可能为神经退行性疾病的...
载体：AAV2/1-retro-Syn-eYFP-Cre、AAV2/8-CaMKIIα-DO-SK2&AAV2/8-CaMKIIα-DIO-SK2-mCherry 注射体积：300nl 观察时间：4周 1.6 初级运动皮层&顺向跨突触（rAAV2/1）Nature Neuroscience. (IF=19.912). Yao J,et.al. (2018). A corticopontine circuit for initiation of urination. [腺相关病毒...
图2. 基底脑桥核(BPN)注射AAV2-retro标记皮层-BPN环路 图3. 病毒对小鼠皮层、下丘脑、杏仁核等脑区的标记情况 另外,这种病毒展现出优秀的携带基因工具的能力,除了比较常规的表达目的基因以外,该病毒还可以结合一些热门的研究手段,例如双光子钙离子成像技术、CRISPR/Cas9基因编辑技术等等。因此,这种AAV的应用非常广泛...
病毒产品:维真生物-AAV(retro)-hSyn-GFP; 注射方法:局部注射小鼠脑室某区; 病毒滴度:4.77×10E13VG/mL; 注射量:100nL; 取材时间:注射后2周取材拍摄; 结果:病毒被轴突吸收,逆行到胞体,到达海马CA1区,得到了十分满意的实验结果 【维真生物-AAV病毒应用】注射位点 ...
借助定点注射和整体注射,rAAV载体能够在大量细胞中广泛表达,中枢神经系统中最常用的包括rAAV2/1、rAAV2/5、rAAV2/8、rAAV2/9、rAAV2/retro、rAAV2/PHP.eB等,这些病毒载体对于不同细胞亦有一定的亲和性,在具体研究时需注意不同血清型的选择(和元...
原文:AAV9-Retro mediates efficient transduction with axon terminal absorption and blood–brain barrier transportation 图1. AAV注射到小鼠VTA的皮质区域荧光表达情况 二、hGFAP:星形胶质细胞特异性启动子 作为星形胶质细胞内的主要骨架蛋白, GFAP在细胞核和细胞膜之间形成连接,参与细胞内细胞骨架重组、细胞黏附、维持...
病毒产品:维真生物-AAV(retro)-hSyn-GFP; 注射方法:局部注射小鼠脑室某区; 病毒滴度:4.77×10E13VG/mL; 注射量:100nL; 取材时间:注射后2周取材拍摄; 结果:病毒被轴突吸收,逆行到胞体,到达海马CA1区,得到了十分满意的实验结果 【维真生物-AAV病毒应用】注射位点 ...