宿主细胞残留DNA(Host cell DNA, HCD)是指可能残留在生物制品中的来源于宿主细胞的DNA片段。由于较大片段的HCD可能含有开放阅读框,能够翻译成蛋白,因而存在潜在遗传毒性和致肿瘤性的理论风险,HCD已被广泛认定为AAV生产工艺中最关键的CQA之一。各国药品监管机...
Host cell proteinsMS, ELISA Residual cell DNAqPCR, HTS Residual DNA from raw materialqPCR, HTS Empty/intermediate particles Ratio vg (qPCR)/vp (ELISA) Electron microscopy, AUC * LAL, limulus amebocyte lysate; qPCR, quantitative real-time PCR; HPLC, high-performance liquid chromatography; ELISA,...
Illumina精度更高,但Pacbio擅长长片段测序有助于研究AAV产品的genome integrity。结果显示,Sf9体系生产的AAV纯度更高(rep-cap plasmid和host cell DNA更少),chimeric events也更少。深入研究同时发现两种体系生产的AAV都有不同程度的tr...
在这种治疗方法中,目的基因被导入到靶细胞(target cells)内,它们或与宿主细胞(host cell)染色体整合成为宿主遗传物质的一部分,或不与染色体整合而位于染色体外,但都能在细胞中得到表达,起到治疗疾病的作用。 病毒载体则是将目的基因导入靶细胞的重要一环。目前有两大类病毒载体最为常用,一类是逆转录病毒载体(Retrovir...
Differences between cell surface receptors of the AAV serotype determine its tropism but it is also believed to be affected by cellular uptake, intracellular processing, nuclear delivery of the vector genome, uncoating, and second strand DNA synthesis. After discovering that the capsid surface proteins...
Residual host cell DNA quantitation Residual plasmid DNA quantitation Quantitative Sf-Rhabdovirus DNA Kit Digital PCR system Fill and finish development Once the final product has been purified and has passed the necessary quality and release testing criteria for clinical use, it is ready for formulatio...
DNA, ViralBlotting, SouthernElectrophoresis, Agar GelChromosome MappingCloning, MolecularKaryotypingA key feature in adeno-associated virus (AAV) replication is efficient integration of the viral genome into host cell DNA to establish latency when helper virus is absent. The steps involved in this ...
在这种治疗方法中,目的基因被导入到靶细胞(target cells)内, 它们或与宿主细胞(host cell)染色体整合成为宿主遗传物质的一部 分,或不与染色体整合而位于染色体外,但都能在细胞中得到表达, 起到治疗疾病的作用。 病毒载体则是将目的基因导入靶细胞的重要一环。目前有两大类 病毒载体最为常用,一类是逆转录病毒载体...
腺相关病毒属于微小病毒科(parvovirus),为无包膜的单链线状DNA病毒,基因组大小约4.7kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点,广泛应用于动物体内研究。 腺相关病毒血清型众多(12种),不同血清型对不同组织亲和性不同,因此在具体科学研究中,...
在这种治疗方法中,目的基因被导入到靶细胞(target cells)内,它们或与宿主细胞(host cell)染色体整合成为宿主遗传物质的一部分,或不与染色体整合而位于染色体外,但都能在细胞中得到表达,起到治疗疾病的作用。 病毒载体则是将目的基因导入靶细胞的重要一环。目前有两大类病毒载体最为常用,一类是逆转录病毒载体(Retrovir...