为了筛选出能穿透血脑屏障并在整个中枢神经系统中有效转导的AAV血清型,研究者将衣壳文库静脉注射到成年GFAP-Cre小鼠中,这些模式小鼠能够特异性在星形胶质细胞中表达Cre。一周后,从脑和脊髓组织中分离DNA,并设计引物,对有Cre介导重组的恢复衣壳序列顺序的基因组进行PCR扩增。 研究者将整个cap文库克隆到rAAV-cap-in-c...
例如,基于Cre重组的AAV靶向进化(CREATE)系统(图2)将短肽段插入到rAAV9衣壳上以改变其属性,已有研究用该方法成功获得了AAV-PHP.B。AAV-PHP.B在C57BL/6小鼠模型中表现出了优异的穿透血脑屏障(BBB)的能力,因此被广泛用于小鼠的中枢神经系统(CNS)研究。然而,后续的研究表明,AAV PHP.B的这种特性并没有在其它品系...
ANXA3的敲除可以逆转疼痛行为但是不能阻止疼痛的发生和发展。 综上,我们可以看到靶向脊髓的细胞可以有神经元特异性的启动子hSyn,广谱性的启动子CMV,星胶特异性的启动子GFAP,对于小胶质细胞而言也可以用小胶特异性的启动子F4/80,血清型多选用使用最为广泛的9...
案例1：研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26...
Magdalena Go便采用该策略构建了cre依赖的AAV(AAV-FLEx-Ngn2/Nur1),注射到星形胶质细胞特异性表达cre的小鼠(GFAP-Cre mice)体内,从而实现了脑内星形胶质细胞特异性过表达Ngn2/Nur1(图6. B、C)。同样,如果将两对不同的loxP位点间序列改为靶基因的shRNA序列,则可以实现细胞特异性的干扰。
由于AAV的polyA位于lox71和lox66 位点之间,因此被成功递送到细胞内的AAV的ployA序列会在Cre酶的作用下,完成序列反转。作者针对反转后的序列设计了特异性引物,于是只有被递送到细胞内后反转了的AAV序列才可以被扩增出来,这样就可以与注射后AAV高背景完全区分开。经...
赛业生物可提供高纯度、高滴度、多种血清型的AAV现货病毒,基因类型包含EGFP、mCherry及Luciferase荧光蛋白、Cre重组酶、GCaMP6f钙指示、化学遗传及光遗传等工具酶,货期短,质量优,欢迎咨询订购。 咨询订购 热门活动推荐 2024年11月15日-12月31日期间,现货病毒限量试用,定制套装3998元起。
Cre重组酶-AAV Cre/loxP重组酶系统,指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心,Cre重组酶可以识别LoxP序列并进行重组,在新型基因打靶中获得广泛应用,是由Sternberg和Hamilton提出,应用于小鼠基因工程中的重要工具。派真生物提供的AAV-Cre可以灵活、高效地敲除Gene-floxed小鼠,免去Cre小鼠维...
并且使用该rAAV基因组生成AAV病毒文库,然后将AAV病毒文库以1x1011vg/小鼠的剂量注射到成年的GFAP-Cre小鼠、Vgat-IRES-Cre小鼠和Vglut-IRES-Cre小鼠中,用于筛选能够分别转导星形胶质细胞、GAGA能神经元(GABAergic neurons)和谷氨酸能神经元的变体。在两轮筛选以后,发现许多变体富集在从一种或多种Cre细胞系中回收的...
AAV-Synapsin-Cre (Serotype DJ/8) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 SL101521 AAV-GFAP-GFP (Serotype DJ/8) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 SL101522 AAV-GFAP-mCherry (Serotype DJ/8) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 SL...