AAV-DIO是指利用腺相关病毒(AAV)作为载体,将感兴趣的基因通过双子嘧啶酸 (DIO) 序列的调控,在特定的细胞类型中实现选择性的基因表达。 AAV-DIO的原理可以简单概括为以下几个步骤。首先,将感兴趣的基因与DIO序列相连接,构建成AAV载体。然后,将AAV载体经过特定的处理,使其能够有效地传递到目标细胞中。最后,在目标...
利用AAV病毒载体(搭载DIO或FDIO)结合我们的嗜神经病毒HSV/RV/PRV/VSV等标记系统可以精确获得中枢及外周神经系统特定区域或特定类型神经元多级输出网络、输入网络及单级输入或输出网络。 3. 神经元活动监测及操控 利用AAV病毒载体表达神经元活动监测的探针,如Gcamp6等,结合相关技术可监测动物在不同活动或刺激状态下特定...
利用AAV病毒载体可实现广泛表达，也可实现部分细胞类型的特异性表达；基于Cre或Flp系统，利用AAV搭载DIO或...
为了进一步增加小胶质细胞的靶向策略,借助转基因小鼠,CX3CR1-Cre小鼠+AAV-DIO的策略,是当前标记小胶质细胞的第一梯队方案[3]。 本文中,作者将两对反向的loxp位点,插入到EGFP两端,构建在AAV6中,借助AAV6注射到CX3CR1-Cre小鼠的脑中,高效标记小胶质细胞。1ul/位点,1E+13vg/ml。综合两篇文献,我为老师们推荐...
AAV-DIO过表达(光/化学遗传元件) AAV-CRISPR 运输和储存 对于长距离运输,应先将腺相关病毒载体保存在 -80℃,再采用全程干冰运输,以防滴度下降。 腺相关病毒载体在 -80℃保存 6 个月,滴度不会明显下降。建议保存 6 - 12 个月以上的样品,进行实验前,重新测一次滴度。应尽量避免反复冻融(小于 3 次)。
载体：AAV-CaMKIIα-Cre-GFP &AAV-DIO-caspase-3 注射体积：两支病毒1:1混合注射100nl 观察时间：4周 1.5 海马、皮层&逆向非跨突触（rAAV2/retro）客户发表文章：Biological Psychiatry. (IF=11.984). Bing Xing Pan,et.al. (2018). Chronic stress causes projection-specific adaptation of amygdala ...
hEF1a启动子,从人翻译延伸因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 1(EEF1A1))的启动子区克隆得到,长度为1.3kb,组成型表达,无细胞组织特异性。 DIO,或者称DiO (Double-floxed inverse Orientation),是和Cre配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Lox序列组成,特征序列是Lox2722r-间隔1...
DIO元件的作用是被Cre识别，从而表达ChR2。
AAV pEF1a-DIO-FLPo-WPRE-hGHpA载体序列是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册AAV pEF1a-DIO-FLPo-WPRE-hG...
病毒方面,直接在目标脑区注射带有荧光蛋白载体的AAV,如AAV-hSyn-EYFP、AAV-DIO-ChR2-EYFP等等即可实现顺向示踪[5]。然而此种顺向示踪技术并不能排除路过某脑区而未形成突触这一现象,需后续电生理记录验证。 单纯疱疹病毒(HSV、 VSV)和伪狂犬病毒(PRV)都能实现跨突触的顺行追踪。2017年1月,美国南加州大学的李...