这篇文献中[2],研究人员利用免疫荧光实验验证了用rAAV2-GFP转导大鼠之后的表达情况,证明了AAV2对肾脏的有效转导。 下表是小编根据文献总结的不同肾脏细胞对应的血清型,老师们可以根据需要进行选择: 2 特异性启动子 肾脏研究中,大多使用广谱性的启...
另外,我们还比较了同一血清型病毒载体(AAV2/8)包装CAG和CMV两种启动子时的表达差异,在视网膜下腔注射后两周检测GFP荧光蛋白表达情况,发现在两种启动子作用下,GFP在感光细胞的表达量相差不大,但明显的差异是AAV2/8-CMV在RPE细胞有很强的表达,而AAV8-CAG在相同部位几乎没有表达(图4), 说明AAV8-CAG对感光细胞特...
二、特异性启动子 常规CMV、EF1等广谱启动子一般不具有细胞特异性，而针对皮肤组织特定细胞的靶向研究相对较少，目前仅有一些关于表皮角质形成细胞和黑色素细胞的特异表达相关研究。角蛋白中间丝是上皮细胞的主要蛋白质成分，是一个由54个保守基因组成的大家族编码，K5/K14和K1/K10是表皮表达的4种主要角蛋白。K5/K...
图3 CMV和cTNT在心脏表达的特异性比较[2]此外，将带有EF1a和cTNT的AAV病毒通过心肌内注射感染8-10周龄小鼠，60天后通过冰冻切片观察感染效率，结果显示，cTNT在心脏中表达效果更好。图4 EF1a和cTNT在心脏表达的特异性比较[3]15周小鼠心梗造模2天后，将AAV-periostin(POSTN)-GFP病毒通过尾静脉注射体内，3周后...
CMV启动子：可以在近端小管(PT)和集合管(CD)细胞中提供强烈的GFP表达。KSPC启动子：可以在整个肾小管（从近端小管到集合管)中提供基因表达。SGLT2启动子：可以在近端小管细胞中提供表达，但不能在集合管细胞中表达。NKCC2启动子：在近端小管和集合管细胞中的表达都很微弱。ECAD启动子：仅在集合管细胞中提供...
含通用CMV启动子的载体转导效率不受ITR1 gRNA影响。为更精准评估CRISPRa方法效果并对比不同gRNA,对未表达gRNA及分别表达ITR1、ITR2、ITR3向导RNA 的AAV-Titer-dCas9-VP64细胞进行活细胞成像检测。结果显示,相较于亲本 AAV-Titer-dCas9-VP64 细胞,表达ITR gRNA 的细胞系中,含神经元特异性 hSyn启动子的AAV8和A...
活体成像显示CMV 广泛表达，荧光素酶活性测定实验进一步表示心肌肌钙蛋白 T 启动基因在心脏特异表达。图 ...
图2. 不同血清型的AAV-GFP通过肾静脉逆行注射感染肾脏 肾脏中细胞构成复杂，尽管血清型在研究中可以选择广谱性启动子CMV，也可以针对不同细胞选择相应的特异性启动子以获得最佳感染效果，如感染肾脏足细胞可选择Nphs1、Nphs2，感染肾小管上皮细胞可使用Ksp-cadherin、SGLT2等。表一所列为汉恒生物提供的用于肾脏特异...
图3.rAAV2-CMV-GFP、rAAV8-CMV-GFP和rAAV9-CMV-GFP在肾脏中的转导效率和转录活性比较 实验动物:6周龄雄性129/Sv小鼠 注射方式:尾静脉注射 注射量:5×1011vg 启动子:CMV 数据来源于:Combined Paracrine and Endocrine AAV9-mediated Expression of Hepatocyte Growth Factor for the Treatment of Renal Fibrosis...
如果您的目标是广泛表达,那么广泛活跃的启动子,如CAG(具有CMV即时早期增强子的鸡β肌动蛋白启动子),是一个不错的选择。如果您有特定的靶细胞类型,您可能想尝试不同的启动子,例如,CamkIIa具有神经元特异性。另一方面,具有Cre或Flp依赖性基因表达的rAAV载体可以注射到具有在特定细胞类型中表达Cre或Flp的动物中,导致...