2、Oligo capping method方法(又称RLM-RACE)是由日本东京大学铃木等人开发,可以更精确的定位转录起始位点。我们知道真核生物的mRNA具有一个3’尾巴和一个5’帽子结构,该技术正是利用5’端的帽子特性对全长分子进行富集和扩增。降解的mRNA5’端都有一个磷酸基,用碱性磷酸酶去掉该磷酸基,随后用烟草酸性焦磷酸酶...
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2、Oligo capping method方法(乂称RLM-RACE)是山日本东京大学铃木等人开 发,可以更精确的定位转录起始位点。我们知道真核生物的mRNA具有一个3尾 巴和一个5帽子结构,该技术正是利用5端的帽子特性对全长分子进行富集和 扩增。降解的mRNA5,端都有一个磷酸基,用碱性磷酸酶去掉该磷酸基,随后用烟 草酸性焦磷酸酶...
*5' RACE Outer Primer在退火温度55-65℃内都可以很好扩增,实际最佳退火温度可以根据自己的引物调整。 2、Inner 5' RLM-RACE PCR: (1)在冰上按照下表所示配制PCR体系: RT reaction(上一步反转录得到) 1-2µl 10X High FidelityPCR Buffer 5µl ...
2、Oligocappingmethod方法(又称RLM-RACE)是由日本东京大学铃木等人 开发,可以更精确的定位转录起始位点。我们知道真核生物的mRNA具有一个 3’尾巴和一个5’帽子结构,该技术正是利用5’端的帽子特性对全长分子进行富集 和扩增。降解的mRNA5’端都有一个磷酸基,用碱性磷酸酶去掉该磷酸基,随后 用烟草酸性焦磷酸酶...
採用RLM-RACE法,根據已獲得的鹽角草膽鹼單加氧酶基因的部分序列,設計2條特異性嵌套PCR引物,成功地克隆了該基因cDNA 5'末端全序列,測序結果顯示該片段包括5' UTR 154個核苷酸和編碼區606個核苷酸,編碼N端202個氨基酸.Blast P結果表明,該片段編碼的蛋白序列與遼寧鹼篷及其他藜科植物的膽鹼單加氧酶同源性達到85%...
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我想问一下关5'RLM RACE对于miRNA剪切位点的确认的原理是什么?就是miRNA识别靶基因mRNA的话不是进行...