为优化和发展猪手工克隆(pig—HMC)技术,探讨利用DNA甲基化转移酶抑制剂(5一Aza-CdR)处理供体细胞对猪手工克隆胚胎发育潜能的影响,尝试建立一种既不影响供体细胞的生长形态,又能降低供体细胞细胞核的甲基化状态的最适浓度和方法,从而提供一种提高手工克隆胚胎发育效率的方法。材料与方法本实验所用卵母细胞来源于南宁...
方法选取A549细胞株经5-Aza-CdR处理后,采用半定量RT-PCR、活性酶连续循环比色法、流式细胞仪(FCM)和MTT法分别对Dnmts的m RNA转录水平、Dnmts的催化活性、细胞生长状态进行检测,分析A549细胞Dnmts转录水平及活性、A549细胞系增殖及周期变化和凋亡与5-Aza-CdR的关系。结果对照组和药物组Dnmt1和Dnmt3b的m RNA表达水平...
并且 SOX2 基因启动子区的 DNA 甲基化水平也有所下降.5-Aza-CdR 处理 AID 基因敲减细胞后,OCT4 和 SOX2 的表达量较对照组 明显升高,而 NANOG 却没有发生变化.结果显示,5-Aza-CdR 处理转 AID 基因细胞可改变细胞形态,细胞周期和报告基因的表达, 5-Aza-CdR 处理后基因组整体去甲基化和 AID 基因的位点特异...
摘要:目的 探讨启动子甲基化对CEM/C1白血病细胞KLF4基因的作用及5-Aza-CdR干预对启动子甲基化的影响。方法 使用不同浓度的5-Aza-CdR处理急性淋巴细胞白血病CEM/C1细胞,采用噻唑蓝(MTT)检测去甲基化药物5-Aza-CdRa对CEM/C1细胞增殖的影响,并利用半定量逆转录聚合反应(RT-PCR)检测去甲基化药物处理后CEM/C1细胞中...
方法用特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理胶质瘤细胞株U251及SHG-44,72小时后采用相差显微镜观察药物处理前后细胞的形态变化。结果加5-Aza-CdR前SHG-44及U251细胞呈上皮细胞生长特征,加入5-Aza-CdR72后,细胞表现为体积逐渐缩小,核仁不清晰,贴壁细胞较对照组减少。结论在人胶质瘤细胞系SHG-44和U251中,5-Aza...
摘要:研究 5-Aza-CdR 对 Notch1 通路影响及神经再生的影响,并通过小鼠主动回避行为实验来探 讨 5-Aza-CdR 对小鼠学习记忆能力的影响。 目的研究 5-Aza-CdR 对 Notch1 通路影响及神经再生的影响,并通过小鼠主动回避行为实验来探 讨 5-Aza-CdR 对小鼠学习记忆能力的影响。
5-Aza-CdR
本试验通过实时荧光定量 PCR 方法对多能基因 Oct4和 Nanog 及 DNA 甲基化相关基因 Dnmt1和 Tets在徒手克隆(handmade cloning,HMC)胚胎中的表达模式进行初步研究,并探讨5-Aza-CdR 处理重构胚对这些基因表达模式的影响。结果显示,Oct4、Nanog 和 Tet3的表达在2细胞时期达到顶峰,Dnmt1和 Tet2基因的表达随HMC 胚胎...
5-Aza—CdR对非小细胞肺癌细胞株A549细胞TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响
摘要:目的 观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的人卵巢癌细胞株(SKOV3、3AO) RASSF1A mRNA及蛋白表达的影响.方法 卵巢癌细胞株(SKOV3、3AO)经不同浓度(0.5、5、50 μmol/L)的5-Aza-CdR处理,未经处理的作为对照组,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印记(Western Blot)检测RASSF1A在mRNA和...