使用 BCA 试剂盒测量总蛋白浓度.剩余 将其打入新的培养瓶并分组:对照组,XMD8-92 组,表 上清中加入 1/4 体积的 5× 蛋白上样缓冲液,煮沸 10 min 皮生长因子组,XMD8-92+ 表皮生长因子组.当细胞贴壁 后备用.蛋白在 10% SDS-PAGE 凝胶中以 120 V 电泳,随后,分别干预 4 个组:完全培养基,XMD8-92(5...
SDS蛋白上样缓冲液(6×)北京索莱宝生物科技有限公司 BCA蛋白质定量试剂盒天根生化科技(北京)有限公司 PVDF膜美国Millipore公司 十二烷基硫酸钠(SDS)北京索莱宝生物科技有限公司 30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺博士德生物工程有限公司 (30%Acr-Bis) 过硫酸铵(AP)武汉赛维生物科技有限公司 ...
10X 糖蛋白变性缓冲液 10X GlycoBuffer 2 反应缓冲液 10% NP-40 分子量 147,000 daltons。 质量保证 无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。 单位定义 1 单位指 100 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 5 mg 神经氨酸苷酶酶解后的非变性胎球蛋白中切除 0.68 nmol O-连接二糖单位所需要的酶量(1 unit 的...
浓缩蛋白质溶液(5篇)浓缩蛋白质溶液(5篇)以下是网友分享的关于浓缩蛋白质溶液的资料5篇,希望对您有所帮助,就爱阅读感谢您的支持。篇一:浓缩蛋白质溶液 丙酮浓缩蛋白溶液步骤 操作步骤:1)2)3)4)5)步骤2;1,cold acetone(-20℃)2,1体积样品+4体积冷丙酮;混匀,-20℃过夜 1 ...
取总蛋白提取物100 μg,上样量为450 μL,pH 3~10非线性IPG胶条17 cm进行等电聚焦电泳,条件为:30 V、12h,500 V、1 h,1 000 V、1 h,8 000 V、8 h,500 V、4 h。等电聚焦结束后采用12.5%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)胶进行...
白和免疫球蛋白)和沉淀。沉淀用0.2mol/LpH8.0EDTA解析得凝 血酶原。凝血酶原中加入2mol/LCaCl2,使Ca2+终浓度为0.1m ol/L,25℃下激活2h。经离子交换纯化后,凝血酶的比活达到604.4U /mg,回收率为74.3%,纯化倍数为15.7。再经SephadexG.7 5进一步纯化,用0.05m01/L、pH7.2的Tris.HCl缓冲液上 ...
考马斯亮蓝法(Bradford 法)检测样品的总蛋白含量, 加入上样缓冲液煮沸10 min,离心并取30 μg 蛋白 质上样到 SDS-PAGE 进行电泳,再将蛋白质转 到0.22 μm PVDF 膜,牛奶封闭 1 h 后膜与一抗 (1∶1 000) 4℃孵育过夜,次日牛奶封闭1 h 后与二 抗(1 2 000)室温孵育1 h,发光试剂发光,X 线胶 片进...
用IPTG诱导阳性克隆表达融和蛋白,SDS-PAGE观察表达产物. 再通过Western—Blotting鉴定.简化的hPK.5基因的RT-PCR产物为264bp.通过酶切、测序等 方法鉴定简化的hPK.5基因正确克隆至原核表达质粒pGEX-IXT中.重组质粒pGEX.1XT/ predhPK-5在大肠杆茵中成功地表达出了GST/predhPK.5融合蛋白,并通过免疫学测定,相 对...