使用 BCA 试剂盒测量总蛋白浓度.剩余 将其打入新的培养瓶并分组:对照组,XMD8-92 组,表 上清中加入 1/4 体积的 5× 蛋白上样缓冲液,煮沸 10 min 皮生长因子组,XMD8-92+ 表皮生长因子组.当细胞贴壁 后备用.蛋白在 10% SDS-PAGE 凝胶中以 120 V 电泳,随后,分别干预 4 个组:完全培养基,XMD8-92(5...
1. 10 μl 反应体系中,加入2 μl 的RNase B、1μl 10X糖蛋白变性缓冲液和 5 μl H2O。 2. 于100°C煮沸 10分钟。 3. 加入1 μl 10X GlycoBuffer 2反应缓冲液和 1 μl 10% NP-40。 4. 加入1 μl糖苷内切酶。 5. 37°C温育 1小时。 6. 将反应产物上样于10-20%的 SDS-PAGE胶。 注意事...
分别采用胰蛋白酶(Tp)、赖氨酰肽链内切酶(Lep) 和Tp 与Lep联用进行胶内酶切的效果比较:牛血清蛋白BSA 的条带(100ng) 通过SDS-PAGE 获得,然后分别用Tp、Lep 和Lep+Tp 进行酶切,再用MALDI-TOFMS 法进行分析。蛋白酶的实验效果如下表: 表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切结果对照 Tp Lep Lep +Tp ...
25、离心管,4°c保存约5min.3胶条的平衡每根胶条加入5ml平衡液配方如下,平衡20min平衡液200ml100ml500ml60mmtris-hcl(ph6.8)8ml4ml20ml2%sds4g2g10g5% p -me10ml5ml25ml10%甘油20ml10ml50ml0.05%澳酚蓝o.lg0.05g0.25g四蛋白电泳第二向(sds-page)30%丙烯酰胺储液的配置(30%acr, 0.8%bis)分离胶的配置以...
浓缩蛋白质溶液（5篇）浓缩蛋白质溶液(5篇)以下是网友分享的关于浓缩蛋白质溶液的资料5篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。篇一：浓缩蛋白质溶液 丙酮浓缩蛋白溶液步骤 操作步骤：1）2）3）4）5）步骤2;1，cold acetone（-20℃）2，1体积样品+4体积冷丙酮；混匀，-20℃过夜 1 ...
取总蛋白提取物100 μg,上样量为450 μL,pH 3～10非线性IPG胶条17 cm进行等电聚焦电泳,条件为:30 V、12h,500 V、1 h,1 000 V、1 h,8 000 V、8 h,500 V、4 h。等电聚焦结束后采用12.5%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)胶进行...
Онас Спикеры Подписчики Экспоненты Отзывы заинтересованный Stanford Doerr ... The Doerr School of Sustainability fosters a respectful and inclusive environment through virtual Respectful Community workshops led by Senior Associate ...
用IPTG诱导阳性克隆表达融和蛋白,SDS-PAGE观察表达产物. 再通过Western—Blotting鉴定.简化的hPK.5基因的RT-PCR产物为264bp.通过酶切、测序等 方法鉴定简化的hPK.5基因正确克隆至原核表达质粒pGEX-IXT中.重组质粒pGEX.1XT/ predhPK-5在大肠杆茵中成功地表达出了GST/predhPK.5融合蛋白,并通过免疫学测定,相 对...
(2)SOD提取条件为:在红细胞溶解液中加入0.25倍的预冷乙醇和0.15倍预冷氯仿,使血红蛋白变性沉淀。上清中加入2倍体积的冷丙酮沉淀SOD,把沉淀溶于磷酸缓冲液后,再经Cu2+热变性等操作提取SOD。所得SOD粗品比活为1650.9U/mg,回收率为83.3%。(3)血红素提取条件:向血红蛋白沉淀中加入红细胞体积5倍的丙酮,调其pH值...