1、封闭液配制:5%脱脂奶粉,0.05%Tween-20,20mM Tris-HCl,pH7.5～8.0,150mM NaCl 。 2、将膜放入封闭液室温封闭60min或4度封闭过夜。 注意事项: 1.为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2.本产品仅供科研使用,严禁它用。 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动...
配制5%的脱脂奶粉封闭液(5g脱脂奶粉+100ml 1 × tbst),待转膜结束,将膜泡在 5%奶粉封闭液中,孵育盒放在摇床封闭1小时,转速为20rpm。 [0121] ( ⅴ )一抗孵育 [0122] 根据maker指示的位置裁剪目的条带,根据抗体说明书中的比例用抗体稀释液配制一抗:β-actin(1:1000),prodh(1:2000)撤去封闭液,加入稀释好...
Q1、BSA或是酪蛋白的封闭液都行,封闭是为了封闭抗原没有占据的空白点,跟你的多肽用何种蛋白偶联没有任何关系! H、小弟课题牵涉到ELISA检测血清中抗原,在网上看到封闭液的配方又很多种,由于经费有限,小弟想是否也可以效仿western blot 使用脱脂奶粉作配封闭液,不知各位有没...
配制5%的脱脂奶粉(5g脱脂奶粉+100mlTBST缓冲液)封闭液,将膜放入盛有封闭液的容器中,室温摇床封闭1h。注意:1.可用考马斯亮蓝将凝胶染色以判断转移情况。 2.NC膜可置于丽春红染色液中,室温下染色5min,用双蒸水洗膜至水变清,无色蛋白条带清晰,说明染色效果好。(五)、一抗孵育准备:抗体、5%脱脂奶粉、自封袋、...
（3）配制蛋白样品：每孔加入5µl蛋白原液，补加PBS稀释（稀释可节省蛋白，记住稀释倍数，蛋白较多时也可不稀释直接加蛋白原液测；蛋白孔可做2~3个平行孔，测量时取平均值较准）（4）加入BCA工作液：每孔各加200µl已配好的工作液 ，盖上板盖混匀30秒，37℃孵育30min，放好蛋白样品。（5）测蛋白浓度：...
1.试剂配制 ⑴5%封闭液:封闭脱脂奶粉5g TBS-T 100ml充分混匀后,4℃保存 (牛奶易变质,3天有效期,最好现用现配) ⑵3‰TBS-T:TBS 1000ml Tween20 3000µl磁珠搅拌混匀,PH调到7.5左右 ⑶一抗封闭液:一抗稀释液 一抗移液枪充分混匀,配成(1:300~500) ⑷内参封闭液:一抗稀释液 内参移液枪充分混匀,...
封闭液/抗体稀释液:5%脱脂奶粉,现配:脱脂奶粉1.0g溶于20mL的TBST中。 Loading buffer:成分主要是SDS,甘油,溴酚蓝,Tris,β-巯基乙醇。其中甘油的作用是使样品沉到点样孔而不漂浮起来;SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS的数量是不一样的;溴酚蓝是指示剂,相对分子质量...
(1)免疫印迹实验封闭液:称取5g脱脂奶粉溶于100ml tbst; [0053] (2)抗体工作液:用免疫印迹实验封闭液稀释1000倍; [0054] (3)完全培养基:在对应的500ml mem、dmem或rpmi 1640培养基中加入50ml fbs及5ml青链霉素双抗。 [0055] (4)维持培养基:在对应的500ml mem、dmem或rpmi 1640培养基中加入10ml fbs及5ml...
1、包被6c93d6:用包被液分别配制1ug/ml和0.25ug/ml6c9-3d6抗体,每孔100ul,4℃包被过夜。 2、pbst洗板5次,30s/次。 3、每孔加入250ul封闭液,37℃孵育1.5h。 4、pbst洗板5次,30s/次。5、稀释人dr5(sinobiological,10465-h08h):用抗体稀释液配制得到2ug/mldr5;以2倍比稀释2ug/mlhumandr5,稀释16个...