1.成脂诱导分化操作1.1 接种干细胞取对数生长期3T3-L1的细胞，按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿，于37℃，5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。NOTE：如细胞贴壁性较差，建议使用 0.1%明胶对培养底 面进行包被。1.2 细胞分化诱导于37℃，5%CO₂...
● 3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞卷边飘起; ● 细胞代数越多,成脂能力越弱,需要诱导的时间也就越长,可适当增加地塞米松和胰岛素用量; ● 实验中所使用的溶剂遵循现用现配的原则。 ●参考文献● [1] Zebisch K , ...
3T3-L1成脂诱导—染色注意要点 1. 当观察到脂滴时，便可以进行油红O染色，如脂滴较小，可以延长诱导时间2-3d。诱导时间过长会导致脂滴脱落到培养基中，随着换液损失脂滴，所以成脂诱导的染色时间点应以镜下观察为准，并不是诱导时间越长越好。2. 油红O染色液时过饱和溶液，使用1×PBS稀释后应该沉淀或离心处理...
以下为详细的成脂诱导分化步骤:1. 细胞准备:首先,将3T3-L1细胞正常培养至融合度达到80~90%,随后用胰酶消化并计数。 2. 接种细胞:以2~3×10^4cells/cm^2的密度将细胞接种于六孔板中,每孔加入2 mL的3T3-L1细胞完全培养基。 3. 培养条件:将接种好的细胞置于37℃,5% CO2的培养箱中进行培养。 4. 诱导开始...
本产品可用于 3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色。特点优势诱导分化程序简单便捷成脂诱导效率高质量控制本产品已经过无菌检测、 pH 测试、渗透压检测、内毒素检测。声明：本产品供科学研究和生产使用，用于组织和细胞的体外培养；禁止临床使用。诱导分化完全培养基液的配制方法1.配制前将特级胎牛血清及成脂诱导添加物放置...
3T3-L1细胞成脂诱导分化步骤 (以六孔板为例) 1.3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)正常培养,细胞的融合度达到80~90%时,即可用胰酶消化,计数。 2.按2~3×104cells/cm2的细胞密度接种在六孔板中(具体接板数量以实际预实验情况为准),每孔加入2 mL的3T3-L1细胞完全培养基。
从添加诱导剂开始到分化结束，通常需要8天。第6天脂滴就可能出来，分化效果好时，第4天脂滴就可能出现。3T3-L1细胞添加诱导剂时，手法要轻，尽量用枪头贴壁逐滴加入，避免对细胞造成冲击。注意事项 细胞代数越多，成脂能力越弱，需要诱导的时间也就越长。可适当增加地塞米松和胰岛素用量。实验中所使用的...
在实际操作中，首先需要将70-80%密度的3T3-L1细胞消化分散，转移到新的培养瓶中，使用富含糖的DMEM培养基，保持37℃恒温培养，每2-3天更换一次培养基。成脂诱导阶段，通常在72小时后移除成脂诱导剂，用含10% FBS的DMEM培养基替代，让细胞稳定为脂肪样细胞状态，至少5天以上。为了评估成脂过程，可以...
1.接种诱导细胞:取对数生长期的细胞,按照2×104cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度90-100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 2. 细胞分化诱导:于37℃,5%CO2培养环境下培养约3天,更换为成脂诱导分化培养基维持液,培养1天后,再更换为成脂诱导分化培养...
培养及成脂诱导过程 一、3T3-L1细胞的培养 培养基准备3T3-L1细胞常用的培养基为DMEM高糖培养基,含10%的小牛血清(CF),1%的青霉素/链霉素(P/S),并在37℃、5% CO2的恒温培养箱中保存。 细胞解冻将冻存的3T3-L1细胞快速解冻,加入预先配好的DMEM高糖培养基中,并将混合液分装到预先消毒的细胞培养瓶中。在37℃的...