90%完全培养基+10%DMSO或商品化细胞冻存液 14 注意事项 （1）3T3-L1分化能力下降可能与过度传代有关，建议使用低代次（P15以内）细胞，另外血清批次差异也会影响分化能力，建议使用新鲜血清或验证过的优质FBS，分化前需让细胞达到接触抑制，即融合2天后诱导；（2）3T3-L1细胞贴壁不良，可能的原因是过渡消
3T3-L1是从小鼠胚胎中分离出来的成纤维细胞，当3T3-L1细胞从快速分裂到长满接触抑制时，该细胞经过前脂肪向脂肪样逆转，该细胞可用于研究糖尿病、肥胖症等疾病。【细胞特点】【细胞培养建议】该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3....
3T3-L1经典成脂诱导过程 诱导步骤：将融合后的3T3-L1（汇合度100%）细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h，之后每隔一天更换常规新鲜培养基，一般第九天染色。PS：不...
1.成脂诱导分化操作1.1 接种干细胞取对数生长期3T3-L1的细胞，按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿，于37℃，5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。NOTE：如细胞贴壁性较差，建议使用 0.1%明胶对培养底 面进行包被。1.2 细胞分化诱导于37℃，5%CO₂...
诱导步骤:将融合后的3T3-L1(汇合度100%)细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h,之后每隔一天更换常规新鲜培养基,一般第九天染色。
诱导步骤:将融合后的3T3-L1(汇合度100%)细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h,之后每隔一天更换常规新鲜培养基,一般第九天染色。
本期细胞学堂,普诺赛将为大家带来3T3-L1细胞基础信息、培养注意事项、诱导分化过程及注意事项。 01 基础信息 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 成纤维细胞样 推荐传代比例 1:3-1:4 推荐换液频率 2~3次/周 生长培养基 DMEM+10%CS+1% P/S 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 培养条件 气...
3T3-L1细胞培养注意事项 1. 细胞生长较快 培养时应加入足量的培养基，避免培养基营养快速耗尽导致细胞脱落或状态变差。注意关注培养基颜色变化和细胞密度，培养基变黄后及时换液，细胞密度到达80%后及时传代。2. 控制密度 注意控制细胞密度不要过高，长期高密度培养易导致细胞状态变差；密度也不要过低，接种密度太低...
3T3-L1细胞培养注意事项 细胞密度:细胞密度是影响3T3-L1细胞分化的重要因素,过低或过高的细胞密度都会影响分化效果;密度一般控制在90%的汇合度,如果太低,则会影响细胞生长和分化,如果太高,则会导致细胞死亡和分化受阻。 培养基:3T3-L1细胞最适宜的培养基是DMEM高糖+10%新生牛血清。 传代:3T3-L1细胞的传代次数应该...
第3 阶段 3T3-L1 细胞向脂肪样细胞的分化 实验步骤 1.从培养箱中取出细胞培养板,去除DMEM培养基,并每孔添加2-3 mL MDI诱导培养基(记为第0天)。 注意: (1)3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,加液时尽量让枪头沿着侧壁缓慢加入,减小对细胞的冲击,防止细胞卷边飘起。