培养好3T3-L1细胞后,就可以开始准备成脂诱导了。我们先来了解一下成脂分化是一个怎样的过程: 前脂肪细胞是一类同时具有增殖和分化为成熟脂肪细胞能力的前体细胞,此种前体细胞在不同的生长因子、激素等物质的作用下,经历有丝分裂克隆期、生长停滞期、进一步的克隆期、终末分化四个阶段,细胞本身的成纤维状态发生改变,...
1. 细胞准备:首先,将3T3-L1细胞正常培养至融合度达到80~90%,随后用胰酶消化并计数。 2. 接种细胞:以2~3×10^4cells/cm^2的密度将细胞接种于六孔板中,每孔加入2 mL的3T3-L1细胞完全培养基。 3. 培养条件:将接种好的细胞置于37℃,5% CO2的培养箱中进行培养。 4. 诱导开始:当细胞融合度达到90%~95%时...
1)将3T3-L1前脂肪细胞接种于培养板，用含10%小牛血清的高糖DMEM培 液在37℃、5％CO2培养;2)待细胞长满至80-90%，融合2天（融合的意思是指让细胞接触抑制，就是 长满后换液让其再长两天）后，加含终浓度为0.5mmol/L IBMX（储存液浓度0.5mmol/L）、终浓度为1umol/L(储存液浓度为1mg/ml(2.5mmol/...
3T3-L1小鼠脂肪细胞 细胞常规说明: 培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗 冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液 细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染 传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次 特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反...
1、按常规贴壁细胞培养法培养于含10%NCS DMEM高糖培养基中,37C、体积分数为5% CO2、饱和湿度条件下培养,2天换液一次。 2、3T3-LI细胞系的诱导:细胞生长状态良好时实验。细胞传代分瓶,每一瓶中的细胞数约为1×105,每48小时换液。当细胞接触抑制2天后,加入诱导剂(10%胎牛血清FBS的高糖DMEM培养液(含10ug/ml...
脂肪细胞分化方法3T3-L1DifferentiationProtocol 3T3-L1 Differentiation Protocol Step 1: 3T3-L1细胞传代于35或60-mm培养板中，使用DMEM-F12培养基培养2 day（以此为基点，即：诱导分化的第0 day）。Step2: 使用诱导液I诱导3T3-L1分化。加入配制好的诱导液I于 3T3-L1细胞中，培养2 day（诱导分化的第2 day）。...
📈 培养流程: 接触抑制2天。 诱导剂I培养3天。 诱导剂II培养4天。 之后换普通DMEM培养基继续培养,观察细胞状态决定是否收细胞。💡 胰岛素用量提示: 胰岛素的用量是根据个人换算,仅供参考。适当多加或少加对最终结果影响不大。💪 祝大家都能成功诱导出脂肪细胞,再见!
3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗地塞米松抵抗素目的:建立胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型.方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,诱导分化为脂肪细 胞,采用地塞米松诱导建立3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,检测不同时间段细胞培养基中葡萄糖浓度的变化,同时运用RT-PCR技术检测抵抗素 (Resistin)基因的表达.结果:随着时间的变化培养基中的葡萄糖...
Step2:使用诱导液I诱导3T3-L1分化。加入配制好的诱导液I于3T3-L1细胞中,培养2 day(诱导分化的第2 day)。 诱导液I:0.5mM IBMX; 0.25μM地塞米松; 1μg/ml insulin; 含10% FBS的DMEM-F12。 Step3:使用无血清培养基清洗细胞,去除残余的IBMX和地塞米松。使用诱导液II诱导细胞分化,并培养2 day(诱导分化的第...