📚 一、实验原理1️⃣ 比色分析法:利用比尔定律,当一束单色光通过有色溶液时,由于溶液吸收了部分光线,透过光的强度会减弱。溶液的厚度越大,浓度越高,透过光的强度越弱。将被测物质与已知量的同种纯物质按相同方法转变为有色溶液,标准液。2️⃣ 3,5-二硝基水杨酸反应:还原糖(如葡萄糖、麦芽糖)与3,...
3,5-二硝基水杨酸法是常用的测定甘蔗茎节总糖和还原糖含量的方法。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好。具体步骤如下: 1. 样品制备:取适量甘蔗茎节,去除表皮和髓部,仅留下髓骨。将髓骨切成小丁块,加入清水,煮沸5分钟,离火冷却后离心取上清,过滤掉杂质,即为样品。 2. 取样:取样品5mL,加入试管中。 3. 加...
具体操作步骤如下: 1. 取一定质量的山楂片粉末,加入适量的蒸馏水,加热水浴至沸腾,过滤,将过滤液冷却至室温。 2. 取0.2 ml 过滤液,加入2 ml 3,5-二硝基水杨酸溶液,摇匀后在60摄氏度恒温水浴中反应10分钟,然后放冷。 3. 吸收液的吸光度在515 nm处测定,还原糖含量的计算公式为:还原糖含量(%)= (As–A0)...
实验步骤 (一)制作葡萄糖标准曲线 取7支具塞刻度试管,编号,按表5所示的量,精确加入1g/L葡萄糖标准液和3,5-二硝基水杨酸试剂。将各管摇匀,在沸水浴中加热5min,取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温,再以蒸馏水定容至25mL刻度处,混匀。在540nm波长下,用0号管作为参比调零,测定显色液的吸光度值。以...
实验步骤 1.制作葡萄螗标准曲线 取7支具有25mL刻度的血糖管或刻度试管,编号,按表1所示的量,精确加人浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液和3,5-二硝基水杨酸试剂。将各管摇匀,在沸水浴中加热5min,取出后立即放人盛有冷水的烧杯中冷却至室温,再以蒸馏水定容至25mL刻度处,用橡皮塞塞住管口,颠倒混匀(如用大试管,则向每...
下面是该方法的步骤: 1.准备一定浓度的3,5-二硝基水杨酸溶液。可以将一定量的3,5-二硝基水杨酸粉末溶解在适量的溶剂(如醇)中,制备出一定浓度的3,5-二硝基水杨酸溶液。 2.准备样品溶液。将待测糖溶解在适量的溶剂中,制备出合适浓度的糖溶液。 3.反应。将一定量的样品溶液与一定量的3,5-二硝基水杨酸溶液混合...
3,5二硝基水杨酸法的测定方法: 1.样品的测定——吸取待测样品(发酵液)2ml于25 ml的具塞的刻度试管中,加DNS(显色剂)3ml,沸水浴沸腾5分钟,冷却后加入水20ml混匀,520nm比色。 2.标准曲线——吸取1mg/ml葡萄糖标液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8ml,依次加入25 ml的具塞的刻度试管中,加...
3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂:称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中,溶解后移入1000mL容量瓶中,加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL,再加入45g丙三醇,摇匀,冷却后定容至 1000mL。 葡萄糖标准溶液:准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg,加少量蒸馏水溶解后,以蒸馏水定容至100mL,即含葡萄糖为2.0mg/mL。
DNS试剂配制方法:首先称取3,5-二硝基水杨酸6.3 g,氢氧化钠 21.0 g充分溶解于500 ml蒸馏水中(水先煮沸10分钟后冷却)冷却后加入酒石酸钾钠182.0g,苯酚(在50℃水中融化) 5.0g,偏重亚硫酸钠5.0g,搅拌至全溶,定容至1000 ml。使其充分溶解后盛于棕色瓶中,放置10天后便可使用。平时盛一小瓶放在...
(3)3,5—二硝基水杨酸把6.3g3,5—二硝基水杨酸溶于262ml2mol/l的氢氧化钠中将此溶液与500ml含有182g酒石酸钾钠的热水混合,向该溶液中加入5g重蒸酚和5g亚硫酸钠,充分搅拌溶解待溶液冷却后,用水稀释到1000ml,存储于棕色瓶中。四、操作步骤 (一)葡萄糖标准曲线的绘制1.按下表制备9个管 四、操作...