20μlpcr体系常见问题可能原因参考意见产物很少或没有产物引物模板dna存在问题退火温度不合适退火时间不合适延伸时间太短必要时采用热启动引物已降解或者引物浓度不够需要优化引物浓度检查模板dna的浓度贮存条件及质量将退火温度2间隔递减退火时间应为3060s将延伸时间延长1min采用手工热启动pcr或用热启动pcr酶pcr产物有多条...
如何将20μl的pcr反应体系改为50μl的?20ul的体系是:10×扩增缓冲液 2ul,dNTP各0.5mmol/L ,引物各15pmol ,模板DNA 25ng,Taq DNA聚合酶1.2U,Mg2+1.75mmol/L ,加双或三蒸水至20ul.那50ul的呢?怎么文献上面20ul的有的只有浓度没有说要多少体积啊? 答案 体系从二十扩增到五十,加的量按相应倍数增加就行...
支原体检测试剂盒PCR法(20ul体系) 英文名称: 总访问: 3685 国产/进口: 进口 半年访问: 85 产地/品牌: iNtRON 产品类别: 分子生物学试剂 规格: 8次/96次,货号:25233 最后更新: 2024-12-5 货号: CAS 号: 参考报价: 500元/3630 立即询价 电话咨询 ...
RT体系20ul×50次/PCR体系50ul×80 次 XG-P2843 存储条件:-20℃保存两年。 制品说明:M-MLV 4 是通过基因重组技术改造,在大肠杆菌中表达纯化得到的高温反转录酶,去除RNaseH活性。可在42℃-65℃条件下 合成 链cDNA,具有灵敏度高,特异性高,热稳定性高和半衰期长的特点。聚合能力强,具有更强的延伸能力,可...
对于RT-PCR而言,最主要的还是两大因素:模板和引物 模板就是cDNA的质量好坏以及目的基因的保留程度,...
一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,20ul或者20ul多做几管;如果仅仅是为了检测目的条带的话,尤其反应数目很多的情况下,就可以做小体系的如10ul,既节约了药品又提高了实验效率;此外,体系内部的成分按比例变化就可以了。10...
引物各10~100pmol 0.5ul,模板DNA 0.2ug,Taq DNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L 1.5ul,加双或三蒸水至20ul。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
DNA聚合酶是PCR反应中将游离的散碱基按照模板中碱基的顺序,连接于DNA双链中的粘合剂。目前DNA聚合酶主要有两种类型:一种是从水生杆菌中提取的天然聚合酶;另一种是利用大肠杆菌人工合成的基因工程酶。由于当前分子生物学的迅速发展,人工合成的基因工程酶越来越多地得到应用,在20...
;按照以下剂量配制10ul体系 PCR程序:42℃ 2min 4℃ ∞ 二,反转录反应:按照以下剂量配制20ul体系:PCR程序:37℃ 15min 85℃ 5s 4℃ ∞ 三,Real Time PCR 按照以下剂量配制20ul体系:四,仪器设置 仪器使用的是荧光定量PCR仪Q6-96,设置界面如下图:测试狗文库百科www.ceshigo.com/article.html ...
如何将20μl的pcr反应体系改为50μl的?20ul的体系是:10×扩增缓冲液 2ul,dNTP各0.5mmol/L ,引物各15pmol ,模板DNA 25ng,Taq DNA聚合酶1.2U,Mg2+1.75mmol/L ,加双或三蒸水至20ul.那50ul的呢?怎么文献上面20ul的有的只有浓度没有说要多少体积啊?