总的来说,PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术的主要区别在于它们的应用领域和检测目标不同。PCR主要用于DNA序列的扩增和检测;qPCR可以实时定量检测DNA或cDNA的含量;RT-PCR主要用于RNA分子的扩增和检测;而RT-qPCR则结合了RT-PCR和qPCR的技术,可以对RNA分子进行定量分析。 本文信息搜集整理自互联网。
PCR 在基础科学研究 (如基因功能分析、基因检测)、医学诊断 (如病原体检测和遗传病筛查)、法医鉴定 (如身份鉴定) 以及环境监测 (如生物多样性研究) 等具有广泛的应用，是现在生物技术和遗传研究的核心工具。当然，各类 PCR 实验除了在特点、应用、优缺等有诸多不同之外，其实验操作也是有区别滴~接下来就和小 M ...
这是目前全新的一种 PCR 检测方式,能对核酸进行检测和定量,采用直接计数目标分子而不依赖任何校准物或者外标,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目。 由于这种检测方式具有比传统荧光定量 PCR 更加出色的灵敏度和精确性,数字 PCR迅速得到广泛的关注,尤其在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测、核酸拷贝数变...
2 病原体检测：采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。3 药物疗效考核：对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型...
一般通过一步法或两步法进行，一步法是RT反应和PCR反应在同一试管中进行；而在两步法中两个反应是分开依次进行的。5. 实时荧光定量逆转录PCR（Real-time RT-PCR, RT-qPCR）Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合，其中的“RT”是Reverse transcription（逆转录）的意思，所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆...
无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。RT-PCR技术灵敏且应用广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。一般通过一步法或两步法进行,一步法是RT反应和PCR反应在同一试管中进行;而在...
3.RT-PCR:逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)是一种把RNA分子转录为cDNA后,在体外进行DNA扩增的技术。RT-PCR技术结合了反转录和PCR两个步骤,主要用于RNA分子的扩增和检测,如基因转录水平分析、miRNA表达研究等。 4.RT-qPCR:逆转录实时定量聚合酶链式...
PCR 作为分子生物学的超级工具,有着多种变体。今天,我们就来深入聊聊各类 PCR 的区别及实验操作步骤,让你从此对 PCR 了如指掌!1 各类 PCR ,分不清? PCR (Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,是指…
优点:检测特异性强;灵敏度高;适合进行多重qPCR检测;PCR后续无需处理,节省时间和原料成本。 缺点:需要根据不同的序列,合成不同的探针;探针的水解依赖Taq酶外切酶的活性,定量时容易受试剂和酶性能影响;淬灭难以彻底,本底较高;检测结果很难判断实际的扩增特性。
RT-PCR技术灵敏且应用广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。一般通过一步法或两步法进行,一步法是RT反应和PCR反应在同一试管中进行;而在两步法中两个反应是分开依次进行的。 05 实时荧光定量逆转录PCR