1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液; 2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次; ...
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按...
对于六孔板的一个孔,吸除培养液,根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入1mL细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。加入1mL JC-10染色工作液,充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。 在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-10染色缓冲液...
YOU点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧,又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml...
用PBS 将收集到的细胞离心重悬洗涤两次。细胞用5%三氯乙酸(TCA) 在(4±2)℃下沉淀(18±1)h。最终离心后,将沉淀细胞重悬于1 mL TCA中,并移至含有10 mL 闪烁液的闪烁管中进行³H 计数,或直接移至伽马计数器进行125I 计数。见参考文献[21]、[35]和[36]。 注2:也能采用半体内方法标记并测定细胞增殖...
答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 往方铅矿中加入FeCl3溶液和盐酸,FeCl3与PbS反应生成PbCl2和S,产物中加入饱和食盐水,趁热过滤,利于PbCl2(s)+2Cl-(aq)⇌PbCl4-△H>0正向进行,使PbCl2溶解,过滤除去硫等杂质,滤液A含有PbCl4-、Cl-、Fe2+... 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 ...
3. 标准品配制:取 8 个 1.5ml 离心管,分别标注 S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7,blank, 第一管 S1 中加入标准品/样品稀释液 900ul,第二至第八管中加入标准品/样品 稀释液 200ul,在第一管 S1 中加入(100ng/ml)标准品溶液 100ul 置于漩涡混 合器上混匀后用加样器吸出 200ul,移至第二管,如此反复作对倍...
aCells were washed in PBS 3 times 10 min each and rinsed once in 2× SSC before hybridization. Hybridization was carried out using a Texas Red conjugated 24-mer DNA oligodeoxynucleotide probe (5′-cagatgagccgaatcaaccctggc-3′) complementary to 7SK RNA in a moist chamber at 42°C for 12...
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
培养48小时后将贴壁细胞用4%多聚甲醛固定, 而后PBS洗涤3次, 常规HE染色, 在显微镜下 (Olympus) 观察成骨细胞形态。同时按比例配制BCIP/NBT染色工作液, 48孔板每孔加100μl上述BCIP/NBT染色液, 室温避光孵育5～30分钟, 直至显色至预期深浅, 去除工作液, 用蒸馏水洗涤终止显色。在100～200倍倒置显微镜下, 计...