1、基础培养基预热:将基础培养基在水浴中预热,使其温度与血清相近,有利于混合均匀。 2、计算、混合:在无菌容器中加入适量的基础培养基,然后按照10%的比例加入解冻后的胎牛血清和双抗、添加剂。例如,如果需要配制500ml的10%胎牛血清培养基,则加入50ml的胎牛血清、5ml双抗、5ml添加剂、440ml基础培养基。 3轻轻混...
1、基础培养基预热:将基础培养基在水浴中预热,使其温度与血清相近,有利于混合均匀。 2、计算、混合:在无菌容器中加入适量的基础培养基,然后按照10%的比例加入解冻后的胎牛血清和双抗、添加剂。例如,如果需要配制500ml的10%胎牛血清培养基,则加入50ml的胎牛血清、5ml双抗、5ml添加剂、440ml基础培养基。 3轻轻混...
具体配制步骤如下(以配制100mL、添加1%抗生素的10%胎牛血清为例): 1、消毒操作:在无菌工作台下,确保所有用具和试剂都是无菌的,以防止细胞培养的污染。 2、血清选择:确定胎牛血清的浓度。 3、配制培养基:将胎牛血清用三步法(或常温法)进行解冻,选择适合的基础培养基89mL,接着吸取10mL胎牛血清添加到基础培养基...
1)材料准备:无菌的RPMI 1640培养基,10ml胎牛血清、无菌的移液器和吸头、无菌的培养瓶、无菌的培养皿、37℃、5% CO2的恒温培养箱、超净工作台; 2)胎牛血清的解冻:将胎牛血清提前进行解冻; 3)恢复培养基温度:将RPMI 1640培养基温度恢复到室温温度; 4)计算所需体积:配制100ml含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养...
1)材料准备:准备一个无菌的RPMI 1640培养基,10 mL胎牛血清、无菌移液器和吸头(最好使用规格为1000 uL的)、无菌培养瓶、无菌培养皿、37℃、5% CO2的恒温培养箱、超净工作台; 2)超净工作台在使用前需打开紫外定时照射20-30 min; 3)将冷冻状态的胎牛血清进行解冻,可采取常温法或阶段法,但要注意如果使用常温...
举例来说，假如你配100mL的10%胎牛血清完全培养基，你需要吸取笑绝顷10mL的胎牛血清、1mL的抗生素...
胎牛血清在使用时通常配制成10%的浓度,这是因为胎牛血清含有丰富的生长因子、微量元素和其他营养成分,能够提供细胞生长所需的营养支持。 10%的胎牛血清浓度是常用的浓度,因为它能够提供适宜的细胞生长环境,促进细胞的增殖和分化。同时,10%的胎牛血清浓度也避免了血清浓度过高可能导致的细胞过度生长和形态改变等问题。
其实,10%胎牛血清需要按照一定的比例进行配制,其中剩余的90%主要是基础培养基。具体配制步骤如下(以配制100mL、添加1%抗生素的10%胎牛血清为例): 1、消毒操作:在无菌工作台下,确保所有用具和试剂都是无菌的,以防止细胞培养的污染。 2、血清选择:确定胎牛血清的浓度。
在超净工作台中操作，用移液管向胎牛血清中加入培养液，稀释十倍。
1.清除凝固成分:将采集到的胎牛血液置于无菌容器中,在室温下静置一段时间,待血液凝固后,使用无菌操作的方式移除血液中的凝固部分。常见的方法是使用离心机离心约10-15分钟,将血液中的红细胞和血凝块与血清分离开来。 2.澄清血清:使用无菌操作的方式,将血清从离心后的上清液中取出,并进行过滤澄清。可使用0.22微米的...