镍柱亲和层析蛋白纯化的原理呀,就是利用组氨酸标签与镍离子之间的亲和作用来分离蛋白质。组氨酸有个咪唑基团,带很多额外电子,对带正电的化学物质有静电引力。在PH8.0时,组氨酸标签不带电,不影响蛋白分泌、折叠,但能高度亲和Ni,这样就能把带有组氨酸标签的目的蛋白从复杂样本中分离纯化出来啦。
1、镍柱亲和色谱亲和层析的原理:利用分子间的特定相互作用,它们可以特异性地可逆结合,这种结合力称为亲和力。具有特定亲和力的普通生物分子对:酶:基质类似物、抑制剂、辅酶抗体:抗原、病毒、细胞细胞:细胞表面特异性蛋白,凝集素核酸:互补碱基序列,组蛋白,核酸聚合酶激素或药物:受体,载体蛋白外源凝集素:多糖、糖蛋白、...
His-Tag 是重组蛋白纯化最为常见的标签,其原理是将Ni2+螯合配体固定在层析介质上,组氨酸(His)带有一个咪唑基团,该基团能够与 Ni2+形成配位键并选择性结合,而不带有 His 残基的蛋白不能与 Ni2+形成配位键并结合,这样便能有效地将目的蛋白(具有 His-Tag 的蛋白)与非目的...