加一点Ni柱（这样Ni柱占的比例就加大很多），孵育、电泳试试。也可以试试离子交换层析。
螯合合亲亲和和层层析析介介质质使使用用说说明明书书( ( 完完全全版版) ) 一、 简介 金属螯合亲和层析, 又称固定金属离子亲和色谱, 其纯化原理是利用蛋白质表面的组氨酸与多种过渡金属离子如Cu配位相互作用, 从而能够吸附富含这类氨基酸的蛋2+, Zn2+, Ni2+, Co2+, Fe3+形成白质, 从而达到分离纯化的...
His-Tag可与多种金属离子发生特殊的相互作用,如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+,Fe3+等,其原理是利用蛋白质表面的特性,使之被吸附在凝胶柱上,从而达到分离纯化蛋白的目的。 Ni2+在亲和纯化实验中的使用最为广泛。根据结合基团的不同,Ni2+亲和层析柱可分为俩类——Ni-IDA和Ni-NTA。Ni2+有六个螯合价位,其中Ni-...
组氨酸标签蛋白分离层析亲和蛋白纯化介质 Ni NTA Beads 是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合镍离子( Ni2+)后,可以形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构很有效的保护了镍离子免受小分子的进攻,更加稳定。Ni NTA Beads 可以耐受一定浓度的还原剂、变性...
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Ni Tanrose 6FF(NTA) 亲和层析填料是以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,氨三乙酸偶联于琼脂糖而成,具体性能见表1。Ni Tanrose 6FF(NTA)除了可以耐受苛刻的试剂条件(见表 2)外,因其耐压的基质,可以耐受最高 0.3 MPa 的压力,更稳定,因此该产品更适合用于工业大规模蛋白的纯化,可以在相对较高的流速下,实现对目...