3.4 相关代谢物水平检测 (1)脂质过氧化物:MDA和LPO(lipid peroxidation)水平升高,也可使用相应的试剂盒进行检测。(2)谷胱甘肽代谢:采用试剂盒检测GSH和GSSH,可见GSH水平下降,GSSH水平升高。3.5 铁死亡相关蛋白水平检测 通过qPCR和WB检测铁死亡相关蛋白的表达情况,铁死亡期间通常出现表达上调的基因有:TRF/T...
在铁死亡的检测中,涉及的指标包括细胞活力、活性氧水平、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量和铁离子水平等。这个文章研究了LCN2在缺氧缺血性脑损伤中与铁死亡的关联。他们采用谷氨酸诱导的体外细胞模型,检测了与铁死亡相关的生物标志物及LCN2的表达,并探究了其潜在机制。研究揭示LCN2能够通过激活NF-kB/STAT3信号通路...
研究人员用 C11-BODIPY 染色后,发现 RORγ 反向激动剂通过氧化应激诱导的脂质过氧化促进铁死亡,表现为 MDA 水平增加和铁死亡标志物 Fe2+的积累。形态学分析也显示,RORγ 的反向激动剂诱导细胞质区域收缩和线粒体膜密度增加。综上所述,...
🔊 超声处理:使用30Hz的频率,每次超声10秒,间隔10秒,总共超声1分钟。这个步骤非常关键,之前看到一个经验贴推荐的,效果显著。🌡️ 加热步骤:将样品与工作液混合后,加热时间可以适当延长,建议使用带盖的金属浴(如ThermoQ),方便控制温度和时间。💡 小贴士:如果需要检测脂质过氧化指标,东仁的LPO探针也是一个不错...
1、GPX4和GSH检测方法:1)比色测定法评估GPX4活性;2)通过抗GPX4的抗体检测。2、ROS与脂质过氧化检测方法:1)特异性荧光探针(如DCHF-DA)进行半定量分析;2)ELISA和TBAR检测脂质ROS下游副产物(如4-HNE蛋白质加合物和MDA);3)抑制剂:利用特异性抗氧化性铁死亡抑制剂,如Ferrostatin-1协同分析。铁离子水平...
铁死亡检测指标:MDA(丙二醛)实验注意事项:一般的MDA检测试剂盒(TBA法),作为底物的硫代巴比妥酸(TBA)需要天平称量和高温加热溶解的步骤。而同仁化学研究所的MDA试剂盒中的TBA无需称量和加热溶解的操作,从而减少由于称量等造成的误差,使得实验结果的孔间差更小。同时,还可大幅缩短操作所需的时间。细胞样品通过荧光法检测...
结果,ROS 积累,发生脂质过氧化,触发铁死亡,从而促进急性肾损伤。作者通过TUNEL 染色,发现IDH1-R132H 突变显著加剧了顺铂诱导的近端肾小管上皮细胞 ( PTC) 死亡,而 Lip-1 预处理减轻了这种细胞死亡(Fig1. A、B)。此外,在顺铂治疗后 72 h 的WT和Idh1突变小鼠的肾组织中评估 4-HNE 和 MDA、脂质过...
同样,铁死亡的主要产物丙二醛(MDA)在AGPS敲低后大大降低,而AGPS过度表达后丙二醛增加。综上所述,AGPS可通过促进过氧化物酶体形成和抑制PCa细胞增殖来促进铁死亡的发展。图2 AGPS通过促进过氧化物酶体的产生和铁死亡来抑制前列腺癌细胞的增殖 MDM2 泛素化和修饰 AGPS 并促进其降解 使用Ubibrowser建立了E3连接酶和...
(1)脂质过氧化物:MDA和LPO(lipid peroxidation)水平升高,也可使用相应的试剂盒进行检测。 (2)谷胱甘肽代谢:采用试剂盒检测GSH和GSSH,可见GSH水平下降,GSSH水平升高。 图8. LACTB促进铁死亡[5] 3.5 铁死亡相关蛋白水平检测 通过qPCR和WB检测铁死亡相关蛋白的表达情况,铁死亡期间通常出现表达上调的基因有:TRF/TFR1、...
铁死亡检测指标:MDA(丙二醛) 实验注意事项: 一般的MDA检测试剂盒(TBA法),作为底物的硫代巴比妥酸(TBA)需要天平称量和高温加热溶解的步骤。而同仁化学研究所的MDA试剂盒中的TBA无需称量和加热溶解的操作,从而减少由于称量等造成的误差,使得实验结果的孔间差更小。同时,还可大幅缩短操作所需的时间。