确保酵母样品新鲜且无污染，以保证RNA提取的质量。无菌水 用于清洗实验器具和稀释提取液。离心管和离心机 用于离心分离酵母细胞和上清液。滤纸和过滤器 用于过滤上清液和去除杂质。实验设备 离心机 用于高速离心分离酵母细胞和上清液。恒温水浴锅 用于加热和保温实验溶液。移液枪和吸头 用于精确移取溶液。电子天平 用于称量...
1.2.3TRIZOL试剂盒改进方法提取酵母菌总RNA在收集菌体之前加入1%的蜗牛酶30℃温育20min(对照组温育50min),然后进行菌体离心收集加入1mlTRIZOL,混匀,振荡,冰浴5min,加入200μl氯仿,剧烈振荡30s,12000×g,4℃离心5min,上层水相移入一个新离心管中,加入等体积的异丙醇,冰浴5min,12000×g,4℃离心10min,弃上清...
1.酵母RNA的提取 ①干酵母约0.3克置于离心管内,加入10%氯化钠5毫升,搅匀后置沸水浴加热10分钟。 ②取出离心管,流水猝冷后,3000rpm离心10分钟,上层即为RNA提取液,下层为菌体残渣及变性蛋白质沉淀。 ③将上层清液小心倾入另一离心管中,逐滴加6摩尔/升盐酸,边加边搅拌,随着pH下降,RNA逐渐沉淀析出,当调节pH至...
实验三 酵母核糖核酸(RNA)的提取[1]实验三酵母菌RNA的提取、鉴定及 定量测定 一、实验目的 • 掌握稀碱（NaOH）法分离酵母RNA的原理与方法 •了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。二、实验原理 •（一）目前常用的RNA的制备方法•浓盐法：是用高浓度盐溶液处理，同时加热，以改变细胞壁 的通透性，...
1、酵母RNA的提取 称5g干酵母粉于150ml三角烧瓶中，加50ml0.2％的NaOH，沸水浴中搅拌提取30min。冷却后滴加乙酸使其略偏酸性(pH5~6)。离心(4000r／min，15min)，去除沉淀。向上清液中加入30ml95％乙醇，稍搅拌后静置。待完全沉淀后离心(4000r／min，15min)，去上清液。沉淀加10ml95％乙醇，搅拌后再次离心。
1.RNA的提取：称取2g干酵母粉于100ml烧杯中，加入0.2%氢氧化钠溶液10ml，沸水浴加热30分钟，经常搅拌（如沸水浴过程中溶液蒸干可再加5~10ml氢氧化钠）。然后加入乙酸数滴，使提取液呈酸性（pH试纸检验），离心10-15分钟（4000r.p.m）。取上清液，加入2倍体积的95%乙醇，边加边搅，加毕，静止，...
(1)熟悉酵母RNA的提取方法 (2)掌握地衣酚显色法测定酵母RNA含量的原理和方法 二、实验原理 RNA与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者与3, 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色,该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂,反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20-250微克范围内,光吸收与RNA浓度 成正比。地衣...
2.了解酵母RNA提取的不同方法,掌握稀碱法提取RNA的技术。 二 实验原理: 稀碱法使用稀碱(0.2%氢氧化钠)使酵母细胞裂解,然后用酸中和,除去蛋白质和菌体后的上清夜用乙醇沉淀RNA或调pH2.5利用等电点沉淀。 三 实验技术: 1.细胞破壁的方法: (1)物理方法:研磨法,组织捣碎器法(低温操作,防止变性),超声波法,...
酵母RNA的提取和鉴定实验八酵母RNA的提取和鉴定 一.实验原理 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,由此即可得到RNA制品。 二.试剂 1.干酵母粉。 2.2g/L氢氧化钠溶液。 3.乙酸。 4.95%乙醇。 5.5%磷酸。 6.浓氨水。 7. 3,5-羟甲苯试剂:取比重1.19HCl...
——酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定实验六【实验目的】【实验原理】1.学习稀碱法提取RNA癿原理和操作方法。2.了解核酸癿组分,并掌握鉴定核酸组分癿方法。3.掌握地衣酚显色法及紫外分光光度法测定酵母RNA含量癿原理和方法酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液,在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚癿核糖...